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明日叶的研究状况 明日叶（Angelica keiskei）又名明日草，八丈草，属于伞形科当归属，是一种耐寒的多年生草本植物，原产于日本的太平洋沿岸[1]，我国20 多年前从日本引进，以前主要用来利尿，通便，兴奋，催奶，该植物的鲜叶和制成的干粉可供食用。近年来发现该植物中富含具有生物活性的查尔酮，总黄酮和香豆素类，对肿瘤，糖尿病，新陈代谢疾病有一定的疗效。[2] 人们对明日叶的研究主要围绕其快速繁殖，有效物质的提取与合成，对疾病的治疗作用。 1.愈伤组织培养 明日叶能适应高冷环境，在中、高海拔地区可全年栽种，在低海拔或平原地区适于秋种，现在国内仅有少数几家公司刚引种，栽培面积很小，原料在国际市场价格很高，需求量大。在生产过程中，明日叶植株通常在植后1～2 年即进入繁殖期，开花结实后立即死亡，其果实结实率和种子发芽率均较低，实生苗??不易栽培，而植物组织培养是解决快速获得种苗的最佳方法。[3] 2006年，李佳等报道了以叶片、叶柄和带芽的茎等作为外植体在MS 培养基上培养明日叶的方法。在培养实践中发现，茎段材料比较少，易于衰老死亡，且在短时间内很难达到规模。[3]2010年郭治友等以从基本培养基入手，分别用叶片和叶柄为外植体，在不同激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、丛生芽分化和生根培养等， 以期建立系统的明日叶叶的无性快繁体系，生产大量优质种苗满足生产需要。[4] 结果表明培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA2.0～2.5 mg/L 和N6+6-BA2.0 mg/L+NAA2.0～2.5mg/L 均能诱导产生愈伤组织，但后者优于前者，产生的愈伤组织较多，色深绿，保持时间也较长。在诱导愈伤组织时，叶柄比叶片易诱导。但愈伤组织随着培养时间的延长而黄化衰老，变褐死亡。在培养基中添加有机物质来延缓衰老，同时不断转接继代培养，能获得较多体积较大的愈伤组织团块，从而利于诱导丛生芽。添加CH 或牛奶的培养基均有利于促进明日叶外植体的生长发育，延缓衰老[4]。 2.有效物质提取与合成 明日叶中含有多种人来需要的矿物质，维生素，蛋白质，胡萝卜素以及其特有的查尔酮，香豆素类。 ?查尔酮类化合物广泛存在于自然界中，是一类存在于甘草、红花等多种药用植物的天然有机化合物，其基本骨架结构为1,3-二苯基丙烯酮。由于查尔酮类化合物分子具有较大的柔性，能与不同的受体结合，表现出多方面的生物学活性。近年来科学工作者对其进行了广泛而深入的研究，特别是在抗肿瘤、抗寄生虫、抗HIV、抗炎等多种生物学活性研究与开发上，取得了较快的研究进展。[5] 香豆素类化合物广泛分布于植物界, 只有少数来自于动物和微生物, 在芸香科、伞形科、菊科、豆科、瑞香科、茄科等植物中分布更广, 很多中草药如秦皮、补骨脂、白芷、前胡、独活、茵陈和蛇床子等都含有香豆素类化合物。研究表明, 香豆素类化合物具有明显的药理活性, 如抗H IV、抗癌、对心血管的影响、抗炎及平滑肌松弛、抗凝血等。[6] 2006年，Toshihiro用乙酸乙酯作溶剂，从明日叶茎的榨取液中分离出了13中物质，其中包括6中查尔酮，xanthoangelol I (1), xanthoangelol J (2), deoxydihydroxanthoangelol H (3), isobavachalcone (4), deoxyxanthoangelol H [2,3-(2,2-dimethylpyrano)-4-hydroxy-4-methoxychalcone, 2,2-dimethyl-5-methoxy-8-p-coumaroylchroman] (5), dorsmannin A (6); 三种香豆素类, xanthotoxin (7), isopimpinellin (8), and osthenol (9); 三种黄酮酮, isobavachin (10), munduleaflavanone B (11), and 8-geranylnaringenin (12); 和一种乙炔, (9Z,11S,16R)-dihydroxyoctadeca-9,17-dien-12,14-diyn-1-yl acetate。其中1-3号物质是新发现的，其余十种是作者通过MS和NMR检测并与以往相关文献比较得来的。5号物质是一种已知的半合成产物。其分离得出的13中物质如图所示。[7] 2011年Ji Eun Shin的实验中将烘干的明日叶叶片0.3kg在60℃用3L甲醇浸取3次，每次4h，蒸发甲醇，浸出物溶于1L水，然后依次用与水等体积的二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇进行萃取，这四种溶液再都分别真空蒸发，得到四种萃取物，再对二氯甲烷得到的萃取物进行多次柱