实验一鸡白痢检疫.docVIP

教 案 首 页 课程名称 家畜传染病学 授课对象 动物医学专业1031-2班级 授课学时 2 授课时间 06年10月9日 授课地点 传染病实验室 章节标题 实验一、鸡白痢的检疫 提 纲 实验一 鸡白痢的检疫 的 内 容 及 方 法 1.主要材料：抗原： 其他用具： 2.操作方法: 结果判断: 4.注意事项： 1.血清试管凝集反应： (1)主要材料： (2)操作方法(3)结果判断： 2．血清平板凝集反应： (1)主要材料：血样采取和血清析出同试管法。抗原与试管凝集反应者相同，但其浓度比试管法者大50倍，悬浮于含石炭酸0.5％的12％氯化钠溶液内。 (2)操作方法： (4) 结果判断：观察30―60秒钟，凝集者为阳性，否则为阴性。此试验应在10℃以上室温进行。 实验一 鸡白痢的检疫 的 内 容 及 方 法 1.主要材料： (1)抗原：鸡白痢沙门氏杆菌培养物加甲醛溶液杀菌制成为每毫升含菌100亿的悬浮液，其中加枸橼酸钠和色素(也有不加的)。 (2)其他用具：玻璃板一块多不锈钢金属丝环针厂长约6.5cm，一端为环状，直径约为4.5mm，另一端为针尖状相当于22号针头,针尖端约1mm长作直角弯曲，作为刺“破翅静脉放血时之用夕如无此金属丝环针，可用注射针头及铂环代替多橡皮滴管(垂直时每滴液量为0.05ml)。 2.操作方法:先将抗原充分振荡均匀，用滴管吸取抗原垂直滴一滴(0.05m1)于玻板上，随即用针头刺破被检鸡的翅静脉，使之出血，以不锈钢丝环沾取血一满环(约0.02m1)放于玻板上，与抗原搅拌均匀，并散开至直径约2cm为度。 结果判断: (1)抗原和血液混合后，于2分钟内出现明显的颗粒凝集或块状凝集的为反应。 (2)在2分钟内不出现凝集，或仅呈现均匀一致的微细颗粒或在边缘处由于临干前形成有细絮状物等，均判为阴性。 (3)上述反应以外，不易判定为阳性或阴性的，可判为可疑。 4.注意事项： (1)抗原应保存于8―10℃冷暗干燥处，用时要充分振荡均匀。 (2)本抗原适用于产卵母鸡及一年以上的公鸡，幼龄鸡敏感度较差。 20℃以上室温进行。 1.血清试管凝集反应： (1)主要材料： 教 学 内 容 与 步 骤 (2)操作方法3支，以吸管吸取稀释抗原2ml注入试管1，在试管2及试管3分别注入抗原1ml。然后以另一吸管吸取被检血清0.8ml注入试管1，反复吸吹数次使抗原与血清充分混和，然后从试管1吸出抗原血清混合液lml，注入于试管2，并反复吸吹试管内混合液使充分混和。自试管2吸取混合液lml注入试管3，依上法混合后吸出混合液lml舍弃，最后将血清管振荡数次，使抗原与血清充分混和后，在37℃温箱中放置至少20小时后观察。 (3)结果判断：试管l、2、3的血清稀释倍数依次分别为1:25、1:50、1:100。凝集阳性者，抗原显著凝集于试管底，上清液透明。阴性者，试管仍均匀混浊。可疑者，介于阳性与阴性之间。在鸡1:50以上凝集者为阳性。在火鸡1:25以上凝集者为阳性。 2．血清平板凝集反应： (1)主要材料：血样采取和血清析出同试管法。抗原与试管凝集反应者相同，但其浓度比试管法者大50倍，悬浮于含石炭酸0.5％的12％氯化钠溶液内。 (2)操作方法：用一块玻板以蜡笔按约3cm21滴和抗原1滴，用牙签将抗原与血清混和。 (4) 结果判断：观察30―60秒钟，凝集者为阳性，否则为阴性。此试验应在10℃以上室温进行。