G实验和GM实验-2016-3-31刘恒.pptVIP

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刘恒 广州医科大学附属第一医院 主 要 内 容 一、血清G试验 二、血清GM试验 三、肺泡灌洗液GM、BG试验 大自然中有真菌30余万种,引起人类疾病的致病真菌及条件致病真菌有280余种。近30年来,人类生活的显著变革创造了真菌感染的机会,随着社会的老龄化、广谱抗生素、抗肿瘤药、免疫抑制剂、介入治疗的广泛应用,器官移植的大量开展,尤其是获得性免疫缺陷综合症(ARDS)的流行,急性侵袭性真菌感染明显增多。 -----缪晓辉,翁心华.全国首届深部真菌感染学术会议纪要.中华传染病杂志,2005,23:15-216. ----Martin GS et al. N Engl J Med 2003;348:1546-54. 流行病学与变迁 胡必杰.侵袭性真菌感染的流行病学与变迁.2007 真菌感染组织分布 J Med Assoc Thal,2007,90(12):2630-2637. 刘又宁等.中华结核和呼吸杂志.2011.34(2):86-90 肺部真菌病原体分布 结论: 我国肺真菌病前5位致病原依次为曲霉菌、念珠菌、隐球菌、孢子菌及毛霉菌,其中念珠菌属中以白色念珠菌及热带念珠菌为多。 一、血清G试验 血清G试验原理 血清G试验的临床价值 血清G试验检测方法 血清G试验假阳性的情况 血清G试验假阴性的情况 血清G试验的优势和局限 真菌病早期发病隐匿,症状与细菌、病毒感染相似,给其诊断带来不便,早期诊断真菌病比较困难。 传统的真菌实验室诊断为沙保罗培养基培养24、48h,根据形态学观察确定是否为真菌感染。但此法耗时长、阳性率低,很难早期发现真菌感染。 β葡聚糖广泛分布于多种真菌细胞壁中,为真菌的特有成分,其中(1-3)-β-D-葡聚糖占真菌胞壁成分50%以上,因此当真菌进入人体血液或深部组织后,经巨噬细胞吞噬、消化后,(1-3)-β-D-葡聚糖可从胞壁中释放,使得血液或其他液体中(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,经过检测(1-3)-β-D-葡聚糖的含量能够及时反应真菌感染情况。 血清G试验 --Bellanger A-P,et al.Retrospective assessment of β-d-(1,3)-glucan for presumptive diagnosis of fungal infections[J].APMIS,2011,119(4/5):280-286 --邓林强,余理智,熊章华,等.血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养在诊断深部真菌感染的临床价值[J].实验与检验医学,2008,26(6):601-602. (1-3)-β-D-葡聚糖含量检测与临床诊断对比差异不明显P>0.05 1.1 血清G试验原理 G试验:检测(1-3)-β-D-葡聚糖的试验。 研究发现:马蹄鲎(hòu)凝血系统中凝血酶原G因子能够识别这种葡聚糖,是(1-3)-β-D-葡聚糖的天然检测者。 (1-3)-β-D-葡聚糖 细胞核 (1-3)-β-D-葡聚糖 鲎变形细胞裂解物的G因子 活化G因子 凝固酶原 凝固酶 凝固蛋白原 凝固蛋白(凝胶) ---张鹏等.血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测对真菌感染的诊断价值[J].检验医学与临床.2012.9.(5):564-566. 1.2 血清G试验的临床价值 (1 ,3)-β-D 葡聚糖为真菌细胞壁成分,适用于除隐球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的早期诊断,尤其是念珠菌和曲霉菌,但不能确定菌种。 诊断侵袭性真菌感染(如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)的方法之一。 1.3 血清G试验检测方法 Fungitec G test 阳性阈值为20ng/L 敏感性67-100% 特异性84-100% Glucatell test 阳性阈值为60ng/L或80ng/L 敏感性70-80% 特异性90%左右 1.4 血清G试验假阳性的情况 使用纤维素膜进行血透时,标本接触过含有葡聚糖的材料 ; 化疗或放疗引起的粘膜炎症,使得食物中(1-3)-β-D-葡聚糖通过胃肠道粘膜进入血液循环 ; 使用真菌为原料制成的抗生素,如多粘菌素等; 某些抗肿瘤药物中蘑菇聚糖,K多聚糖等成分含有(1-3)-β-D-葡聚糖类似物 ; 操作者处理标本时存在污染,如纱布棉球等污染。 1.5 血清G试验假阴性的情况 隐球菌具有厚壁包膜,生长缓慢,导致假阴性; 局灶性曲菌病,(1-3)-β-D-葡聚糖很少释放入血; 抗真菌药物的使用。 1.6 血清G试验的优势和局限 优势: 鉴别侵袭性感染与定植; 不受机体免疫状态影响,早于临床诊断平均4天;是早期真菌感染的敏感生物标志。 局限: 不能区分真菌的种类。

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