教你如何检测水产品的孔雀石绿.docVIP

孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，又名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿，其既是杀真菌剂，又是染料，易溶于水，溶液呈蓝绿色。长期以来，渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等，而且为了使鳞受损的鱼延长生命，在运输过程中和存放池内，也常使用孔雀石绿。研究显示，孔雀石绿在鱼体内残留时间长，且具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，鉴于此，许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。我国于2002年5月也将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。目前检测孔雀石绿的方法有两种：HPLC或GC-MS，但是其前处理步骤繁琐，费用昂贵。 大多数的检测是通过孔雀石绿胶体金检测卡和孔雀石绿酶联试剂盒的方法。 这俩种方法都是常见的、并非常有效的快速检测方式。但又存在区别。 检测原理： 孔雀石绿酶联试剂盒是利用免疫学竞争法的原理，在酶标板微孔上预包被孔雀石绿蛋白偶联物。检测时，加入待测孔雀石绿标准品或样品溶液，然后加入特异性的孔雀石绿的抗体一起孵育，溶液中的孔雀石绿跟板上包被的孔雀石绿蛋白偶联物竞争性地与孔雀石绿抗体结合，形成抗原抗体复合物。孵育一段时间后，洗板，加入酶结合物；洗涤后加入显色剂，结合的酶将无色的显色剂转化为蓝色的产物；加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色；在450nm波长进行检测，样品中的孔雀石绿的浓度与吸收光强度成反比。 如图： 孔雀石绿金标检测卡是当样品溶液滴入样品孔后，样品溶液中的孔雀石绿与金标抗体相结合，进而封闭金标抗体上孔雀石绿的抗原结合点，阻止金标抗体与纤维素膜上孔雀石绿偶联物结合，使之显色较弱，甚至不显色；反之，如样品溶液中没有孔雀石绿，则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的孔雀石绿偶联物结合，从而显色较强。