原位杂交在观赏植物中的研究进展精要.pptxVIP

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原位杂交在观赏植物中的研究进展;目录; 一、概述; 1969年,美国耶鲁大学Gall和Pardue首先创立,用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,确定该基因定位于卵母细胞的核仁中。 1971年, Jacob 创立电镜原位杂交技术检测爪蟾卵母细胞DNA 80年代,原位杂交技术飞速发展现已能检测只有数百碱基对的较小分子DNA和含量很低的mRNA。 当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞,探针均采用同位素标记。 1981,Bauman等首先应用荧光素标记cRNA探针做原位杂交,然后用荧光显微镜观察获得成功——荧光杂交技术。 1985年Rayburn首次将原位杂交技术应用于植物染色体的研究,此后在植物研究中得到广泛的应用,特别是在远缘杂交后代的鉴定和遗传物质的检测中,由于直观可靠等优点而倍受青睐。 生物素标记探针技术是Brigat(1983)首先建立的,它利用生物素标记的探针在组织切片上检测了病毒DNA??通过生物素与抗生物素结合,过氧化物酶-抗过氧化物酶显示系统显示病毒DNA在细胞中的定位。 1987年,将地高辛标记的有关试剂及药盒投放市场。地高辛标记技术引起科技工作者的极大兴趣。优点:完全、方便、省时,敏感性和质量控制较好,可检测人基因组DNA的单拷贝基因,背景反差好。 ;二、分类;染色体原位杂交基本流程图;染色体原位杂交的应用;;;RNA原位杂交的特点;三、RNA原位杂交的操作流程;;;探针的制备;;总结

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