芽孢型乳酸杆菌.解读.pptVIP

芽孢型乳酸杆菌的筛选与分离 小组成员 刘晓 童微 肖宇丹 尤瑶 前言 1.1益生菌 1.1.1益生菌的定义 “益生素(probioties)”一词最早由Lilley和Stillweu在1965年使用，被定义为“由一种微生物分泌刺激另一种微生物生长的物质”(姜文侠等，2000)。1974年，Parke:定义益生素为“维持肠道内微生态平衡的活的或死的微生物及其代谢产物”(Parker，1974)。1989年，Fulle:定义益生素为“一种可通过改善肠道菌群平衡，对动物施加有利影响的活微生物饲料添加剂”(Fuller，1989)。关于益生菌的精确定义，虽然众说纷纭，但都包含了以下两个基本性质:一是益生菌是活的微生物;二是通过摄入充足的数量，对宿主产生功能性健康益处 (Fulleretal，1997)。益生菌种类繁多，目前应用比较广泛的有乳酸杆菌、粪链球菌、屎链球菌、枯草芽抱杆菌、双歧杆菌、酵母菌、腊样芽饱杆菌、凝结芽抱杆菌等。 实验 2.1.1 实验材料及设备 园林土壤、白马湖淤泥、园林植物根系土壤 碳酸钙、 枯草芽孢杆菌 实验设备： 二氧化碳培养箱、 恒温培养箱、 高压灭菌锅、 超净工作台、光学显微镜 2.1.2培养基及配置方法  土壤浸汁琼脂培养基 蛋白胨 5g 土壤浸汁 250ml 牛肉浸膏 3g 自来水 750ml 琼脂 15g PH 7.0 土壤浸汁制备法：将含有丰富有机质的园林土壤摊成薄层，压碎，按时翻动使其风干。干燥后，用粗筛过筛。取筛过的土400g，装入一个2L的三角瓶，加960ml自来水混合，121℃高压灭菌20min,再置室温两星期或更长时间。当有沉淀形成时，倾出上清液备用。 培养基中的土壤浸汁的使用量视情况而有所变化。当从一个新来源取土制备土壤浸汁是，先制备少量含土壤浸汁，百分比分别为100.75.25或10的琼脂培养基，用枯草芽孢杆菌接种培养3d，观察芽孢情况，选择形成芽孢最佳的 土壤浸汁百分比制备培养基。 NakayamaYanoshi法1967 分离方法Ⅰ DooresWesthoffi 1983法 分离方法Ⅱ 实验人员分工 刘晓：根系土壤中筛选目的菌 童微：白马湖淤泥中筛选目的菌 肖宇丹：园林土壤中筛选目的菌 尤瑶：沅江边的沙土中筛选目的菌 3.1预期进度及经费预算 5月15-6月1 所有培养基的制备完成 6月2-6月15 土壤悬液中分离出微生物 6月16-7月1 菌种的鉴定 经费 未定 4.1可能存在的问题及解决方案 乳酸杆菌菌落太小，难以发现 由于乳酸杆菌需要的培养时间比较久，培养基容易干 * * 目录 1前言 1.1益生菌------------1 1.2芽孢杆菌-----------3 1.3研究意义-----------6 2实验 2.1实验材料---------6 2.2 试验方案----------7 2.3实验人员的分工-----7 3 预期进度及经费-----8 4 可能存在问题—8 5 参考文献---------8 1.1.2益生菌的作用机理 益生菌主要通过以下途径在体内发挥其作用：（1）补充有益菌群，维持消化道菌群平衡，预防和治疗菌群失调症。通过有益菌群对致病菌的生物拮抗作用(如产生乳酸、乙酸等有机酸类的抑菌物质，分泌小分子的抗菌肽，竞争性的与肠粘膜上皮细胞受体位点结合)，降低肠道和粪便中的致病菌如葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌等的含量（2）刺激机体免疫系统，提高机体体液免疫和细胞免疫水平从而抵抗某些病原体的感染，增强抗病能力；（3）参与菌群生存竞争，协助机体消除毒素和有害代谢产物（4）通过产生多种消化酶，改善机体代谢，直接产生氨基酸、 维生素等营养物质，补充机体营养成分，促进机体生长 1.1.3 益生菌的种类 由于益生菌具有多种生理功能而本身无毒、无残留、无耐药性等优点，故越来越广泛地引起人们的关注，并具有很大的市场潜力。根据美国药品与食品管理委员会公布的统计结果，目前可被安全使用的有益微生物有 43 种，包括乳酸菌、链球菌、肠球菌、酵母菌、芽孢杆菌、真菌等。其中以乳酸菌中的能够在胃肠道中存活的双歧杆菌和乳酸杆菌研究最多，应用也最广泛。目前，活跃于市场的部分益生菌菌株有：芬兰Valio公司的鼠李糖乳杆菌LGG，美国BioGaia公司的露特乳杆菌1063，日本 Yakult 公司的干酪乳杆菌 Shirota，瑞士雀巢公司的嗜酸乳杆菌 LA1，丹麦科汉森公司的双歧杆菌 BB12 等 1.1.4 益生菌的特性 益生菌发挥益生功能有两个前提条件：耐酸耐胆盐和吸附定值。益生菌通常由食物携带或以制剂形式口服，进入人体后，菌体首先通过环境恶