221动物细胞培养张艳芬ppt要点.pptVIP

动物细胞工程常用的技术手段? 动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术 * 归纳: （1）共分成两大阶段： （2）移植过程用到的生物技术： 核移植和胚胎移植 动物细胞培养、核移植、 早期胚胎培养、胚胎移植等 （3）严格来说新个体具有两个亲本的性状 对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 去核卵母细胞 细胞 高产奶牛 去核卵细胞 细胞核 多莉 受体 供体 分析上述哪一种措施更科学？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功。 将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物， 操作也方便。 用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 5.体细胞核移植技术的应用前景 1.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育； 2.保护濒危物种； 3.克隆转基因动物，生产医用蛋白； 4. 作为异种移植的供体， 5.人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可用于组织器官的移植。 6.体细胞核移植技术存在的问题 （1）成功率非常低 （2）克隆动物以表现早衰、生理缺陷等健康问题 （3）克隆动物食品的安全性问题。 1、分子水平----一般指DNA扩增(也叫分子克隆)。 2、细胞水平----细胞克隆。 3、个体水平----克隆羊。 克隆：英文“clone”音译。指无性繁殖系。 即可作名词，还可作动词。 “太空婚礼” 2002年12月30日，中科院上海研究所筹备了十年的“太空婚礼”在神州四号飞船上举行，一对植物“新人”－－黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体；另一对“新人”是小鼠的浆细胞和骨髓瘤细胞，同时在“产房”－－电融合仪内孕育新生命。 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 两烟草太空的婚礼： 黄花烟草 叶肉细胞 革新一号烟草叶肉细胞 离心、振动电刺激、 聚乙二醇(PEG) 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 三、动物细胞融合与单克隆抗体 1.细胞融合： 是指两个或两个以上的细胞融合为一个细胞的过程。 ⑴自然发生： ◆杂交细胞： 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核 细胞成为杂交细胞。 受精作用 一、动物细胞融合 不同DNA的两个细胞 2、细胞融合过程 用胰蛋白酶处理后的单个细胞 一定诱导方法 具有两亲本细胞的遗传特性的单核杂交细胞 膜、 质、 核依次融合。 一、动物细胞融合 4、动物细胞融合原理 细胞膜的流动性 5、动物细胞融合方法 物理法： 化学法： 生物法：灭活的病毒 离心、振动、电激 PEG 病毒颗粒黏 附细胞表面 细胞膜连接 细胞膜被 病毒颗粒穿通 细胞融合、形成杂种细胞 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合， 不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 一、动物细胞融合 4、动物细胞融合原理 细胞膜具有一定的流动性 5、动物细胞融合方法 物理法： 化学法： 生物法：灭活的病毒 丧失感染性 保留融合能力 离心、振动、电激 PEG 7、应用：制备单克隆抗体。 6、意义: 突破有性杂交方法局限，使远源杂交成为可能。 总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 用 途 诱 导 方 法 融合前处理 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物方法 获得部分 或完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 二、单克隆抗体 问题： 抗体由什么细胞产生？ 其化学本质是什么？ 与抗原作用的特点？ 1、抗体： 机体受抗原刺激后产生的，并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 2、抗体分布： 血清（主）、组织液、外分泌液。 抗体的传统生产方法 从血清中分离抗体 该法制备的抗体缺陷： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差。 动物体内 抗原 读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的浆细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每种浆细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个细胞进行无性繁殖，即克隆。 1、单克隆抗体的概念 单: 克隆: 单克隆抗体:单个细胞克隆后产生的化学性质单一、 特异性强的抗体 单个