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项目二 好氧发酵设备系统的维护与保养 2.2发酵罐的中试设备比拟放大运行 (3-2) 第一步、准备工作 1.检查压力表是否为零,若不是则开对应的阀门调零。 2.检查阀门是否为关闭状态,若不是则顺时针旋转关闭。 3.检查蒸汽发生器上的压力表不得低于0.2MPa 4.校正温度和pH探头:温度用沸水或冰水校正,pH用标准溶液校正。 5.检查发酵罐的密封性:关F21,F16,开F11,F15,使压力表为0.1MPa,保持5min,再关F11,F15。 6.若压力保持不变,说明密封性好则打开F16排气。 7.若压力减小,则水封检测漏气点。 第二步、空气管道的消毒 第二步、空气管道的消毒 1.打开F3,F14,微开F12,F13,等排除均匀的蒸汽时,关闭F13,F12,微开F14,调节F3,使压力表保持在0.1MPa,30min,关F14,F3。 开F11,F14,保持压力在0.1MPa,当有干燥冷空气排出时,微开F14,调节F11,保持压力在0.1MPa 第三步、空消 第三步、空消 1.开F4,F22,当有均匀蒸汽排出时,关F22,开F21,F16,当F16有均匀蒸汽排出时,关F16,当压力达到0.1MPa时,微开F16,调节F21,使压力保持在O.1MPa,30min. 2.关F4,F21,大开F16进行泄压,到微正压0.02MPa,再关F16. 第四步 投料 第五步、实消 1.开F2,F37,F16搅拌,当发酵罐内温度达到80—90度时,关搅拌,F2,F37. 2.开F4,F22,当有均匀蒸汽出现时,关F22,开F21,微开F16,调节F21使压力保持在0.1MPa,30min. 3.关F4,F21,然后大开F16泄压到微正压。再关F16. 第六步、参数设定 第七步、冷却 1.在控制面板上冷却打到手动,开F33,F32,搅拌,微开F15,调节F11,罐内压力保持在微正压,当温度降到90度时,关搅拌,大开F15,F11,压力保持在0.1MPa。 2.开F16,泄压到微正压。当温度达到设定温度时,关F33,F32,关F16,调节F11,F15,至F15完全关掉,压力保持在0.1MPa,微开F16,泄压到微正压。 第八步、接种 1.用酒精棉球擦洗双手和种子罐(由上到下) 2.在接种圈内滴加酒精并点燃,围在接种口处 3.带上隔热手套,用扳手将螺帽拧下,过下火焰之后放在干净器皿中 4.将接种瓶在火焰旁拔下棉塞,瓶口过下火焰,之后迅速悬空倒入发酵罐内,将接种瓶放一旁。 5.用扳手夹住螺帽过下火焰,之后拧紧并用湿抹布熄灭接种圈内的火焰。 第八步、接种 第九步、保温 在控制面板上的加热打到自动上,开F32 第十步、取样 1.准备好已消毒的空三角瓶 2.将三角瓶上的报纸拆掉,用手压住纱布,然后开F21,F22,先流掉一部分,之后用三角瓶悬空接溶液,并迅速塞上纱布。 3.关F21,再开F4进行消毒灭菌,之后关F4,F22。 PS:接种注意事项 接种方法:压差接种法 接种材料:种子液、火焰圈、95%酒精、酒精棉、镊子、打火机、石棉手套 注意事项: 环境:关闭车间门窗和排气扇,接种环境周围禁止人员来回走动,降低空气流动性; 无菌:拔接种针护套时需靠在火焰附近,接种壶不可倾斜过度,避免种子液流出;接种操作过程中罐压不能掉零; 安全:拔出接种壶时接种针不可以指向人员,避免接种针飞出后造成人员受伤;点燃火焰圈不可随处乱扔,熄灭以后才可以继续操作。 PS:中控培养注意事项 工艺控制与记录 每间隔1小时记录一次参数; 主要参数有PH值、溶氧值、温度、发酵罐压力和过滤器压力。 取样 依据工艺要求按时取样送交化验部并做好镜检工作。 设备巡查 检查搅拌电机,看电机有没有异响、过热等; 检查酸碱罐、消泡罐和补料罐装液量,及时补充; 检查管道、阀门,看有无外漏。 第11步:放罐 菌体生长情况符合下罐条件以后即可放罐,放 罐操作流程如下: 提前1小时通知后提取车间准备放罐 取样 蒸汽吹洗放罐管道 检查 升压 放罐 填写记录表格 第12步:洗罐 放罐结束以后立即进行洗罐,洗罐流程如下: 卸压:打开罐盖前要先卸掉罐压; 电极保养:拔出电极清洗干净以后进行正确保养; PH电极用3摩尔每升的KCl溶液浸泡电极头; 溶氧电极直接通电。 冲洗罐壁:用高压水枪冲洗罐壁,如果罐壁培养基冲洗不掉则考虑碱煮(10%的碱液用夹套升温到90℃以后保温30分钟); 排污:排掉污水。 第13步:检修 目的:确保阀门、法兰、机械密封和试镜灯等不会泄漏,以备下批生产使用; 方法:罐体通入空气保压在0.15MPa,然后用肥皂水进行试漏,出现泄漏的阀门待压力卸掉以后进行检修,更换相应的垫片。 安全与环保等注意事项 我们的发酵属于纯培养,是由单一菌种接种以 后进行的
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