内生细菌和荧光单胞杆菌的转基因菌株防治桉树青枯病研究.pdfVIP

内生细菌和荧光假单胞杆菌的转基因菌株防治桉树青枯病研究 摘要 本研究在从不同植物材料中分离内生细菌的基础上，筛选出对桉树 基因菌株对青枯菌的拮抗活性。利用有拮抗活性的内生菌株和WCS417r 的转phi基因菌株L3d6、L2c9进行桉树青枯病防治的研究，并在此基础 5r与WCS4l7r和L3d6、CN015 上，设计了内生细菌CN01 r与WCS417r 和L3d二种组合的实验方案，将内生细菌与荧光假单胞杆菌转基因菌株 结合起来共同控制桉树青枯病的发生。最后测定了内生细菌CN015r、 CN017r在桉树组织内生存的能力。本研究获得以下结果： 1．从桉树、番茄、葡萄内分离到的l3个菌株对青桔菌都有一定的拮 5、CN0l 抗活性，其中以CN0l CN084、CN085三个菌的抑菌活性受环境中铁含量的影响。在青枯菌菌 体培养基上产生透明圈的菌株，在KB平板上对青枯菌均有一定的抑制 作用，但透明圈的大小与抑制作用的强弱无关。 2．在室内生防试验中，用109 5r、 CFU·mL一的内生细菌CN078、CN0l CN01 h，CN078、CN015 7r浸泡桉苗根部10．12 r和CN0l7r分别比对照 的发病率降低23．2％、30．0％和31．7％，差异显著(n=0．05)。 3．12个WCS417r的转phi基因菌株对青枯菌都有明显的抑制作用， 且抑制作用大多强于WCS41 7r，其中以L3d6拮抗活性最强。在室内生 防试验中，通过菌液浸根的方法，L3d6能显著抑制桉树青枯病(a=O．05)， L2c9也比对照的发病率降低22．5％。但这2个转基因菌株的抗病效果不 及WCS417“ ． 4．在内生菌与WCS4l 7r转基因菌株联合控制桉树青枯病生防试验 中，CN015}+WCS4l7r、CN015r+L3d6、CN017r+WCS417、CN017r+ L3d6四个组合对桉树青枯病都有明显的防治效果。其中CN015r与L3d6 结合，CN017r与WCS41 7r结合能够获得增强的防病效果。 5．在测定单一菌株对桉树青枯病的防治效果时，采用顶端接种和根 部浸泡两种处理方法得到的结果相互一致，而在探讨多种菌联合防治桉 树青枯病效果时，这两种方法得到的结果却有出入。在室内测定单一菌 株对桉树青枯病的防治效果时，可以考虑首选顶端接种的方法。 内生细菌和荧光假单胞杆菌的转基因菌株防治桉树青枯病研究 6．桉树内生细菌CN0l5r和番茄内生菌CN017r均能定殖于桉树组织。 CN015r和CN017r能在桉树组织内向上和向下转运，CN015r主要分布于 根部组织，CN017r在除开顶芽的其它部分均有分布。 关键词：生物防治；内生细菌：桉树：荧光假单胞杆菌 儿 内生细菌和荧光假单胞杆菌的转基因菌株防治桉树青枯病研究 ABSTRACT bacteriawereisolatedfromdifferent Endophytic planttissues，and were their activitiestoRalstoniasolanacearumscreened．The antagonistic 1