苦瓜花药离体培初探.pdf

苦瓜花药离体培养初探 摘 要 花药培养是建立单倍体体系的有效途径之一，结合传统育种方法可以缩短育种周 期，加快新品种选择的进程。有关苦瓜的组织培养研究相对较少，且其主要是进行苦 瓜茎段离体快繁和子叶诱导研究。本试验以三个苦瓜品种的花药为外植体材料，从基 因型、激素配比、花药不同发育时期、预处理时间、不同碳源及其浓度等方面对苦瓜 花药诱导的影响进行了研究， 并将诱导所得的苦瓜花药愈伤组织分为不同状态分别 进行分化诱导培养。本试验的主要结论如下： 1．各品种的花蕾大小与花药发育时期符合以下相关性：当花蕾长度为2．5～ 3．5mm时花药处于四分体时期；花蕾长度为3．5～4．5mm时为单核早期；花蕾长度为 4．5--6．0mm时为单核中晚期。 2．当MS培养基中2,4．D浓度为2．0mg／L、6一BA浓度2．0mg／L时，各品种的花药 愈伤组织诱导率最高，长白苦瓜达到了94．74％，大自苦瓜为82．14％，碧秀苦瓜为 65．91％。6-BA浓度为2．0mg／L时较利于碧秀苦瓜和大白苦瓜花药愈伤的诱导，高于 1．0mg／L和2．0mg／L时愈伤组织诱导率仍保持较高。2，4．D浓度的变化对花药愈伤组 织的诱导影响明显，低浓度2，4．D处理中各品种出愈率均较低，随着其浓度增加，各 品种花药愈伤组织诱导普遍更快、更多，但2，4．D浓度越高时愈伤组织的褐化速度越 快。 3．每个品种都以单核中晚期的花药愈伤诱导率最高，显著的高于四分体时期和单 核早期。单核中晚期时，碧秀苦瓜、大白苦瓜、长自苦瓜的愈伤组织诱导率分别达到 79．74％、74．79％、89．38％。 4．与很多其它花药离体培养中低温预处理促进花药诱导的结论相反，本次试验中 4C预处理出现负效应。供试的三个苦瓜品种花药的愈伤组织诱导率均随着低温预处 理时间的延长而逐渐下降，均以未经过预处理的花药愈伤组织诱导率最高。预处理天 数达4天时，愈伤组织诱导率大幅下降，碧秀苦瓜由53．19％降到18．18％，大白苦瓜 由74．82％降到24．38％，长白从88．40％降到26．83％。 5．蔗糖作为碳源比葡萄糖作为碳源更利于花药愈伤组织的诱导。碧秀苦瓜在蔗糖 浓度为3％时诱导率最高，为83．33％，随着蔗糖浓度增高，出愈率逐渐降低。大白苦 i 瓜和长白苦瓜则在蔗糖浓度为5％时的出愈率高于其他处理，分别达到70．23％和 72．73％。以葡萄糖作碳源时，各品种的愈伤组织诱导率普遍明显降低。葡萄糖浓度为 7％时大白苦瓜和长白苦的出愈率均在10％以下，碧秀苦瓜甚至无愈伤组织产生。 6．诱导出的愈伤组织大致可分为两种类型：一类为黄白色、表面有瘤状突起，转 mg／L， 入分化培养基后较快转绿，体积增大明显，处理为(2)6-BA2．0mg／L，KTl．0 NAA0．2mg／L时愈伤生长状况最好；另一类呈黄白色，表面无瘤状突起，色泽晶莹， 不容易转绿，体积增长不明显，在处理(4)6-BA3．0mg／L、KTl．Omg／L、麦芽糖309／L 中有所转绿，在处理(1)6一BAl．0mg／L、KTl．Omg／L、NAAl．0mg／L中虽然未转绿， 但较好的保持了原有质地状态。 7．合适的激素配比对愈伤的生长状况起重要作用。适当提高6一BA浓度能促进愈 伤组织的转绿和增大。NAA对于黄白色愈伤组织的保存起重要作用。ZT对于苦瓜花药 愈伤组织的生长则无明显促进作用。在处理(1)6-BAl．0mg／L，KTl。0mg／L，NAAl．0 mg／L中，长白苦瓜的一些愈伤组织分化出了根。 关键词：苦瓜 花药培养 愈伤组织 ofbalsam charantia culture Primarystudy pear(MomordicaL。)anther HeYah DirectedProf．LiHuanxiu by of and (CollegeForestryHorticult