柑橘毛状根的诱及其与丛枝菌根真菌的双重培养.pdf

摘要 柑橘可以和丛枝菌根真菌形成互惠共生体——丛枝菌根。丛枝葫根真菌可以帮 助根毛稀少的柑橘获取水分和矿质营养，促进柑橘生长发育，增强柑橘抗逆境能力， 而柑橘可以为丛枝菌根真菌提供所需的碳源。鉴于丛枝菌根对柑橘的重要性，开展 柑橘丛枝菌根的相关研究势必会对柑橘产业的可持续发展产生深远影响。 本研究尝试利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)转化的柑橘毛状根与丛 枝菌根真菌建立双重培养系统，以期为柑橘丛枝菌根的离体研究建立一个初级平台。 主要结果如下： 1． 以发根农杆菌A4d菌株转化40d龄的枳(Ponc打us 研究鱼鳞状划伤处理对毛状根诱导率的影响，其结果为：经过鱼鳞状划伤处理的上 胚轴的转化率为66．7％，未经鱼鳞状划伤处理的上胚轴转化率为29．2％，差异显著。 差异不显著；⑦生长15d的柠檬的上胚轴和子叶的转化率分别为67．5％和23．3％， 差异显著。结果表明柑橘外植体类型是影响转化率的重要因素之一，而苗龄次之； 上胚轴适度老化可以提高转化率。 3．柠檬毛状根显示出形态变异性和形态多样性，通过单克隆筛选获得优良的柠檬 不具有分枝能力，没有获得优良克隆。 4．柠檬毛状根克隆OL2．1在同种培养基上2w和4w后的净生长量差异不显著，而 在不同种培养基上2w或4w后的净生长量却有显著差异。毛状根在培养基Ⅳ生长量 隆OL2，1有毒害作用，并使其致死：而培养基中营养元素不均衡是次要因素。 5．丛枝菌根真菌孢子在培养基1、II、Ⅲ和Ⅳ上的萌发情况具有显著的种间差异 BeckerHall 性，而无显著的种内差异性。珠状巨孢囊霉Gigasporamargarita (NCl2lA)孢子和摩西球囊霉Glomus (CAl27)孢子的平均萌发率分别为38．0％和3．3％，低于前人的研究结果。这表明 AMF孢子对培养基有较广泛的适应性，孢子活力系影响孢子萌发率的主要因素，孢 子活力具有种属差异性。 6．在培养基Ⅳ上将珠状巨孢囊霉孢子和摩西球囊霉孢子分别接种到克隆OL2．1根 尖处，尝试建立双重培养系统。珠状巨孢囊霉与克隆OL2—1成功建立双重培养，形 成丛枝菌根，但是未产孢；摩西球囊霉与克隆OL2—1未实现双重培养。孢予种类、 孢子活力、种内孢予类型、培养皿如何放置等都是影响双重培养建立的诸多参数。 关键词：耩橘；毛状檄；熬棱菌根冀黼；双重培养；发根农秆黼 2 ract Abst Arbuscular aremumaiistic associationsformedbetweencltrus mycorrhizas symbiotic and aid ofwater arbuscular mycorrhizalhmgi。Arbuscularmycorrhizalfungiprocurement and nutritioncitrus with the of mineral roots root·hairs，and by sparse expediteprocess and tonethe ofstresses—resistance up competence resultantly，as growthdevelopment，and wellas the ofcarbonfromcitrus．Asthe ofarbuscular get availability