大白菜花药培养术体系的研究.pdf

大白菜花药培养技术体系的研究 摘 要 以大白菜的9种基因型为材料，进行花药培养。研究大白菜基因型对花药诱导培养的影响：以 F1D．1和F1D．3为材料，研究不同生长季节、花药发育时期、培养条件、预处理以及培养基附加物 AgN03对大白菜花药培养的影响；同时对大白菜花药培养获得的再生植株进行了细胞学观察，并研 究了植株移栽的方法。 结果表明： (1)大白菜不同基因型的花药在培养能力上有差异。供试的9份材料中有两份材料没有愈伤 组织产生；有两份材料有胚状体产生：其它材料产生的都是愈伤组织。 (2)供体植株的生长环境对花药胚状体诱导和分化有一定的影响，春季取材的花药容易诱导 形成胚状体。花粉的发育时期是影响花药培养效果的重要因素。就大白菜而言，选取花粉发育时期 为单核一双核早期的花药进行培养，能获得较高的胚状体诱导率和分化率，而此时花蕾的外部特征 是：花蕾纵径长2～3mm，花药呈淡黄绿色半透明。在进行花药培养时胚状体诱导阶段一般以暗培 养为好，有利于胚状体的形成，而强光有利于以后的绿苗分化。在花药培养前对花蕾进行4C3d的 低温预处理，并且培养初期给予花药33℃ld的高温暗培养。可以获得较好的诱导效果。8％蔗糖浓 度处理的诱导效果最好，高浓度的蔗糖有利于花粉小孢子的萌发，提高诱导率。培养基中补加 10mg／L的AgN03可以有效的促进花药胚状体诱导率。 (3)胚状体转接到分化培养基3天后开始转绿，15天后形成再生植株；愈伤组织转接到分化培 养基先形成大量根，30天后有少量再生植株形成。 NAA+0．8％ (4)通过花药培养胚状体分化获得的大白菜再生植株容易生根，以1／2MS+0．1mg／L 质中容易适应外界环境条件，成活率达100％。 (5)通过染色体的鉴定发现，花药再生植株中有二倍体、多倍体和非整倍体的存在． 关键词l大白菜，花药培养，植株再生，AgN03 大白菜花筠培养技术体系的研究 ABSTRACT Anthersfrom9 were effects were in ofChinese cultured．The genotypes cabbage ofgenotypeanalyzed antherinductionanddifierentiationculture．Factorsthat asdifferent plantregenerationconcerned,such of and concentration growthseason，developmentalstagepollen，cuhure conditions,pretreatmentA斟03 the for duringculturingprocess，wereinvestigatedusinghybridsofFiD-l和F；D一3．Methodstransplanting frommediumtosoilwel-e of regenerationplant studied．Meanwhile，the simultaneously cytology viaantherculture