北五味子木脂素究及其HPLC指纹图谱的建立.pdf

北五味子木脂素研究及其HPLC指纹图谱的建立 }两要 本文以深入有效地开发利用北五味子资源、系统的研究北五昧子化学成分为目 的，以常规方法结合现代植物化学分离手段，建立北无味子提取工艺：在此基础上， 对其部分化学成分分离及结构鉴定进行研究，进而建立北五味子|玎，Lc指纹图谱。为 北五味子资源的高效开发及可持续利用奠定理论及方法学基础。为此，开展本项研究 并取得了如下进展： 1以乙醇为溶剂，以不同浓度的溶剂、料液比(v／V)、超声清洗时间为因素，进 可获得较高的得膏率和总木脂素提取率。 压力、萃取温度、萃取时问为因素，取三水平，用b(3。)正交试验表布置实验，建 立北昧子SFE—C02提取工艺，实验结果表明，以压力30MPa、温度40℃、提取时间 90min可获得较高的得膏率和总木脂素提取率。 3．首次采用超临界流体C02萃取(sFE．C02)，结合常压硅胶柱层析，建立以石油 醚．乙酸乙酯为梯度变化洗脱模式，以200～300目硅胶为固定相，于石油醚一乙酸乙 分别于石油醚一乙酸乙脂40小20：1流分中得化合物(2)和(3)，以上三组化合物分别 以石油醚．甲酸乙酯．甲酸(15：5：1)的上相或甲苯一乙酸乙酯(9：7)为展开剂，以 五味子甲索和乙素为对照品，于薄层层析板中上行展开，确定化合物(2)、(3)分别为五 味子乙素和五味子甲索；以HypersilODS25um(46mm×250mm)；流动相水(A)，甲醇 柱温35℃；进样量3u1。通过峰面积，测得化合物(1)纯度为9896％、化合物(2)纯度 确定(1)为五味子丙素。 4首次应用高速逆流色谱HSCCC一1000分离制备五味子甲素和乙素，以溶剂系统 正已烷．甲醇．水．乙腈(10：5：4：3)的上相为固定相，下相为流动相，流速2m1／min， 转速900“min，从北五昧子(schisandra 素(SchisandrinB)；正已烷．甲醇．水(6：7：5)的上相为固定相，下相为流动相，流 56％。 56％，五味子乙素纯度为98 检测，测得五味子甲素纯度为94 5首次结合超临界流体c02(sFE，CQl萃取工艺，建立北五味子}Ⅱ，Lc指纹图谱。 ODs25um(4 色谱柱：Hypersil 6mm×250mm)，以流动相A水与B乙腈梯度洗脱，O～ 进样量2ul。五昧子高效液相色谱可分离出60个色谱峰，根据10批次供试品测定结 果，经与参照物对照以及比较所有测定和汜录的色谱图，标定共有指纹峰。五昧子 耻Lc指纹图谱中，共有指纹峰14个。 本文创新点： 1首次采用超临界流体c02萃取(SFE—C0：)，结合常压硅胶柱层析，以石油醚． 乙酸乙酯为梯度变化洗脱模式，分离五昧子甲素、乙索和丙索。 2首次应用高速逆流色谱技术分离制备五味子甲素和乙素。 3．首次结合超临界流体(SFE．C02)萃取工艺，建立北五味子珊·Lc指纹图谱。 关键词：北五味子，高速逆流色谱，超临界流体Co：萃取，指纹图谱，化学成 分，提取分离 Ⅱ on the and theHPLC StudyingIigninssettingup flngerprintof 鼢施，2西Ⅵ∞加Pns括(Turcz．)Baill Abstract Wereseafchedthe andset the}Ⅱ’LC of．锄，N口门d}Ⅱ@加P，柳J lignins up 6ngerprint this ThefhJit ofSchisandrachinensiswas (Turcz．)B枷．Inpapef eXtractingpfocess