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三种氯霉素类药物在对虾体内残留消除的研究 摘要 本文以凡纳滨对虾为研究对象，建立了同时检测对虾中氯霉素、甲砜霉素和氟苯 尼考的HPLC-UVD 法；建立了高效液相色谱- 串联质谱法同时检测对虾中氯霉素、甲 砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的方法；研究了上述三种氯霉素类药物在对 虾养殖和加工过程中的残留消除规律。主要研究内容及结果如下： 1、建立了对虾中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的HPLC-UVD 法 以2%碱性乙酸乙酯作为提取溶剂，正己烷脱脂后可直接经高效液相色谱进行分 析。氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考在0.10～10.00mg/L 范围内有良好的线性关系。在 添加浓度为0.25～5.00mg/kg 时，平均回收率为81.00～102.93%，RSD 为1.95～7.10% 。 氯霉素的检出限为0.01mg/kg，甲砜霉素和氟苯尼考的检出限为0.02mg/kg 。 2 、建立了高效液相色谱- 串联质谱法检测对虾中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代 谢产物氟苯尼考胺的方法 以2%碱性乙酸乙酯提取，省去固相萃取（SPE ）和液-液萃取（LPE ）脱脂，浓 缩后采用甲醇和5mmol/L 乙酸铵溶液以0.25mL/min 流速梯度洗脱，LC-MS/MS 电喷 雾电源（ESI ），负离子，选择反应监测（SRM ）模式检测。结果表明：三种药物及代 谢物在0.1～20μg/L 的范围内线性良好，相关系数R2 为0.9997～0.9998 。在添加浓度 为 1.00～5.00μg/kg 时，平均回收率为78.17%～99.86%，RSD 为2.18%～9.27% 。氯 霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的检出限分别为：0.001µg/kg、0.020µg/kg、 0.002µg/kg 和0.003µg/kg 。 3、研究了三种氯霉素类药物在对虾养殖过程中的残留消除规律 在试验水温 28～30℃，1.7～2.0% 的盐度条件下，用分别含 0.5g/kg、1.0g/kg 和 2.0g/kg 三个不同剂量氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的饲料连续投喂10 天，每天2 次， 研究氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在凡纳滨对虾血液、肌肉和 肝胰腺组织中的残留消除规律。残留药物经提取后用HPLC-MS/MS 检测。结果表明： （1）在给药期间，各剂量组三种氯霉素类药物在凡纳滨对虾肌肉、血液和肝胰腺中 的残留量随着给药时间的延长含量逐渐增大，并在第10 天达到最大值。最高剂量组 的肝胰腺组织残留量最大，氯霉素为1827.89μg/kg，甲砜霉素为3710.00μg/kg ，氟苯 尼考为 845.43μg/kg。（2 ）在停药期间，各剂量组三种氯霉素类药物在凡纳滨对虾肌 肉、血液和肝胰腺组织中的残留随着停药天数的延长含量逐渐减少。高剂量组比低剂 量组消除时间长，肝胰腺比血液和肌肉的消除时间长。氟苯尼考胺在对虾各组织中未 检出。停药2～5 天后，对虾各组织中三种药物残留量均在检出限以下。结合软件拟 合的研究结果，三种药物在对虾体内的休药期为5 天。 I 4 、研究了加工工艺对三种氯霉素类药物在虾肉中消除的影响 研究了五种加工工艺对虾肉糜中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考消除的影响。空白 虾肉中添加含三种氯霉素类药物的标准溶液制成含2.0µg/g 剂量，5g 大小的虾肉丸。 虾肉丸中三种氯霉素类药物残留用HPLC-UVD 法检测。用蒸、水煮、烘烤、油炸和 微波加热五种工艺处理虾肉丸一定时间。（1）蒸8min 后虾肉丸中三种氯霉素类药物 残留量下降了41.99～44.50% ，水煮8min 后三种氯霉素类药物残留量下降了53.93～ 56.19%，烘烤4min 后三种氯霉素类药物残留量下降了93.31～95.47%，油炸4min 后 三种氯霉素类药物残留量下降了 93.30～94.91%，微波加热2min 后三种氯霉素类药 物残留量下降了 29.37～41.86% 。（2 ）五种加工工艺条件下，氟苯尼考降至MRL 以 下需要的时间最短，其次是甲砜霉素，氯霉素最长，其中烘烤和油炸对减少三种氯霉 素类药物的残留最有效。 关键词：对虾，氯霉素类药物，残留消除，HPLC ，HPLC-MS/MS II Rules of residu