高效液相色谱法测定红曲莫纳可林及桔霉素—如何防治色素的干扰.pdfVIP

维普资讯 第 28卷 第 lO期 许赣荣等 ：高效液相色谱法测定红曲莫纳可林及桔霉素一如何 防治色素的干扰 高效液相色谱法测定红曲莫纳可林及桔霉素 — — 如何 防治色素 的干扰 许赣荣 陈 蕴 虞 慧玲 王大友 朱 华 (江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡 ，214036) 摘 要 红 曲产 品存在 的色素对桔霉素和莫纳可林 K 的高效液相 色谱分析有 干扰作用，并 造成色谱柱负担过重 。消除色素 的副面影响显得尤为重要。采用 甲苯 ／乙酸 乙酯／甲酸为 溶 剂莘取 固态红 曲样 品，可在莘取较少色素 的同时最大程度萃取桔霉素 。对于液态发酵 的红 曲 样 品．采用 2倍于发酵液体积 的乙醇萃取桔霉素 的方法也优于其他方法。 在 HPLC分析 中，用红 曲的3种色素与莫纳可林 K(酸型和 内酯型)分别进样 或混合后进 样 ．发现当流动相 中的乙睛浓度较 高时，内酯型莫纳可林 K与黄色素有相 当接近 的 出峰时 间。同时，紫色素、橙色素与酸型莫纳可林 K也有相 当接近 的出峰 时间，无法完 全分 离。如 果不预先去除红 曲色素 ，也可通过 降低流动相 中乙腈 的比例 ，有效分离色素与莫纳可林 K，以 提高分析结果 的准确性 。 关键词 红 曲霉 ，色素，桔霉素，莫纳可林 ，HPLc捡 刚 近年来，红 曲霉 的代谢产物 中，具有 肾毒 10侣 。 性 的真菌毒素桔霉素 (citrinin)和具有 降血脂 红 曲产 品中一般含有红 曲色素 (6种 以 功能性成分莫纳 可林 K(monacolinK，或称 上)，对准确测 定桔霉素和 MK有不同程度 洛伐他汀 ，lovastatin，或 mevinolin，本文 中简 的影响。如果样品的萃取方法不当，萃取液 称 MK)格外 引人关注 。常用 的检测方法是 中含大量色素，就不能有效地萃取桔霉素或 先萃取，再用高效液相色谱法定量测定。 MK。在 MK的测定 中，我们还发现，采用 目 在洛伐他汀的测定方面，Vincent等人在 前常用的流动相 [如 V(乙腈)：V(磷酸水溶 80年代初提出了用反相 HPLC法，用反应形 液)=65：35]，红 曲中的黄色素 (ankaflavin) 成的洛伐他汀衍生物进行 定量测 定…。 目 与内酯型 MK 无法分开，橙 色素和紫色 素 前基本上 已形成 了以C，柱作为分离柱 ，紫 (monascorubramine)与酸型 MK 无法分开 ； 外检测 (237nm或 230nm)，采用 乙腈与磷酸 而即使在紫外 230nm 或 237nm测定，橙色 水溶液或 甲醇与磷酸水溶液作 为流动相 的 素、黄色素和紫色素都会 出峰。因此，如果样 HPLC检测方法 [2--4]。也有 的方法 5是 在 品中同时存在色素和 MK，数种物质 同时出 生 产 写 科 研 经 验 HPLC之前采用柱分离色素进行预处理 。在 峰，则测定结果不可信 。 一 桔霉素的检测方 面，Vladimir 等人提出将 功能性红 曲，尤其是液态发酵 ，发酵液中 样品在低 pH(pH2．5)的情况下用 乙酸 乙酯 主要存在酸型 MK，有 的发酵液也含有一定 萃取 。 自从 Blanc等人首次证实红 曲产 品中 的色素或桔霉素，因此对这些成分进行准确 存在桔霉 素 以来 J，萃 取方法还 采用过 乙 的测定是极为重要 的。针对这些 问题 ，我