不同治法方药对脂肪肝大鼠肝组织NF-κBp65 及Kupffer细胞p38MAPK蛋白表达的影响.pdfVIP

2009年3月第26卷第2期 广州中医药大学学报 March Journalof ofTraditionalChineseMedicine 2009，V01．26，No．2 Guangzhou 14l University 文章编号：1007—3213(2009)02—0141—07 不同治法方药对脂肪肝大鼠肝组织NF—KBp65及 Kupffer细胞p38MAPK蛋白表达的影响 杨钦河1， 谢 芳‘， 王凤珍1， 凌家生1， 王 强1， 程少冰1， 唐海兰2， 胡巢凤3， 王彦平3， 孙升云4， 金玲4， 周羽立主5。 陈万群5， 杨环文1， 张玉佩1 生理教研室，广东广州510632；4．暨南大学第一附属医院，广东广州510632； 5．暨南大学医学院生化教研室。广东广州510632) 响。【方法】选用sD大鼠98只，随机分为正常组、模型组、疏肝组(灌服3．2g·kg一·d“剂量的柴胡疏肝散)、健脾组 (灌服lO．O g·ks_‘·d“剂量的参苓白术散)、祛湿组(灌服3．5g·kg～·d“剂量的平胃散)、活血组(灌服7．1g·kg‘1 ·d“剂量的膈下逐瘀汤)、综合组(灌服11．9g·kg～·d“剂量的自拟方)；采用高脂饲料喂养、白酒灌胃法复制大鼠脂 肪肝实验动物模型，给药12周后处死动物取肝组织，应用免疫组织化学法检剜NF-KBp65在各纽中的活性及组织病理学变 化。同时每组取3只大鼠分离Kupffer细胞，应用Western 是上述不同治法方药抗脂肪肝作用的机制之一。 关键词：脂肪肝／中药疗法； 肝组织／病理学； 疏肝； 健脾； 疾病模型，动物； 大鼠 中图分类号：R285．5 文献标识码：A 近年来，随着人们生活方式和饮食结构的改变， 脂肪肝的发生率急剧上升，而有效的防治手段却较 为滞后。核因子．KB(nuclearfactor B，NF． kappa 明暗各12h的室内。大鼠正常喂养1周后按体质量随 KB)与肝脏的炎症、纤维化等发生有密切关系， 机分为7组，每组14只，雌雄各半，分别为正常组、 Kupffer细胞免疫相关信号通路的变化，在脂肪肝的模型组、疏肝组、健脾组、祛湿组、活血组、综合 发生机制中亦发挥着重要作用【1。4]。本实验采用疏 组。正常组以基础饲料喂养，其他各组大鼠按文献 肝、健脾、活血、祛湿等中医不同治法方药对脂肪 [5]方法制备高脂饲料喂养，同时以10mL／kg剂量 肝模型大鼠进行干预，探讨其对脂肪肝大鼠肝组织 灌服体积分数55％红星二锅头白酒，每天上午1次。 各组大鼠均自由饮水、进食，连续12周。 NF—KBp65和Kupffer细胞p38MAPK蛋白活性的影 响，初步提示不同治法方药防治脂肪肝的作用效果 1．2 主要试剂及仪器 及其机制。现报道如下。 1材料与方法 1．1 动物分组及模型建立 SPF级SD大鼠98只， 购于广东省实验动物中心[实验动物合格证：SCXK州四季青生物工程材料有限公司生产；兔抗人溶菌酶 收稿日期：2008—12—02 作者简介：杨钦河(1961一)，男，教授，医学博士、博t后，博士研究生导师 项目(编号：2002031295)；广东省自然科学基金项目(编号：031876) 万方数据 142 广州叶I医药大学学报 2009年第26卷 抗体购于福州迈新生物技术有限公司；免疫组织化学 P物质(sP)法试剂盒购于北京中杉生物技术有限公者体积比为1…11，铺层时，应保证每层之间的界面 司；兔抗大鼠磷酸化p38MAPK单克隆抗体、兔抗大 清晰，避免混淆。放入悬垂式冷冻离心机，