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2013级五年制本科生免疫学实验课 李冬 基础医学院免疫学系 lidong1@jlu.edu.cn 免疫学实验课要求 不迟到、不早退、不缺课。 不允许擅自窜教室，最后无成绩者后果自负。 穿白大衣。 爱护实验器材（用后用水冲洗干净放入指定地点），损坏者按价赔偿。 课后清点物品、摆放整齐，认真打扫教室卫生（擦地面和桌面）。 请将手机设为无声或震动。 免疫实验课安排 2015.3.30-5.15 5次课 20学时 实验内容： 凝集反应与沉淀反应 小鼠脾脏单个核细胞分离 酶联免疫吸附试验 （ELISA直接法） 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验 问题讨论与实验设计 免疫实验课考核方式 实验课成绩： 15分 考核方式： 实验报告(ELISA) 5分 出勤 5分 实验设计 5分 免疫学检测技术的分类 抗原抗体反应 试管凝集试验 双向免疫扩散试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 淋巴细胞检测技术 小鼠脾脏单个核细胞分离 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验 细胞因子检测技术 免疫学常用分子生物学技术 实验报告书写的原则 实验题目：单核细胞分离 实验时间：2015.4.6 实验目的：分离外周血单核细胞 实验原理：由于不同细胞的密度不同，因此可利用密度梯度 离心法将不同比重的细胞分开。 实验材料：试管、抗凝血 实验步骤与结果：肉眼可见灰白层，1ml血收获xx细胞。 结果分析：本次分离细胞较正常人单个核细胞数少，可能原因 一是实验误差所致，二是该患者为白细胞减少症。 只有ELISA要写实验报告！ 实验设计的原则 研究的题目：确定研究题目是开展研究工作的首要任务。 研究摘要：研究背景，要开展的主要研究（可以叙述利用什么样的方法开展研究），研究意义（本次研究的预期成果及其推动科学进步的作用）。 研究内容：叙述主要开展的工作。 研究方案：利用什么样的手段去解决研究内容提到的相关工作。 研究的特色与创新之处：主要科学贡献。 题目：XX细胞因子诱导肺癌细胞凋亡的作用及其机制研究 摘要：肺癌是最常见的肿瘤之一。XX与多种肿瘤的发生发展有关，但其在肺癌中的作用仍缺乏报道。本研究采用人肺癌细胞，利用流式细胞术分析XX诱导人肺癌细胞凋亡作用，通过分析Caspase3,8,12等确定XX诱导肿瘤细胞凋亡机制。本研究不仅可以进一步揭示XX抗肿瘤作用机制，也为寻找新的肺癌治疗方法提供研究基础。 研究内容：1）XX在人肺癌肿瘤细胞的表达分析，确定XX表达与肺肿瘤的关系。2）检测患者血清XX水平，确定其辅助诊断肺癌的价值 研究方案：1）采用肿瘤组织切片，通过免疫细胞化学染色观察XX在人肺癌组织中的表达情况。2）采用ELISA法检测血清XX水平。 研究的特色与创新之处：本研究阐述了XX与肺癌的关系，并提出XX可作为肺癌的血清学诊断标志物，研究发现XX可以诱导肺癌细胞凋亡，并阐述了其作用机制。 分组讨论题目 1）为什么要开展不同的免疫标记技术研究？ 2）流式细胞术可在哪些研究中应用？ 3）检测组织细胞中的蛋白表达的方法有哪些？ 各自有何优缺点？ 4）从外周血中如何分离T细胞？ 全班分四组，请准备PPT，第五次课上讲台！ * *