实验染色与观察.pptVIP

7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 讲台 实验分组 第一次实验 内容： 一、实验室规则 二、介绍本实验安排、考评 三、显微镜（油镜）的使用和保护（示教） 四、细菌的基本形态和特殊结构观察（示教） 五、细菌涂片制备与抗酸染色（操作） 六、特殊结构染色（操作） ★光学显微镜 人眼的分辨率为0.25mm。一般细菌都大于0.25μm，故可用普通光学显微镜观察。 一、显微镜（油镜）的使用和保护（示教） 二.1细菌的基本形态 球形 杆形 螺旋形 球菌 杆菌 螺形菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 革兰染色 10×100 大肠埃希菌 大肠埃希菌 革兰染色 10×100 霍乱弧菌 霍乱弧菌 革兰染色 10×100 二.2细菌的特殊结构 ◆ 荚膜 ◆ 芽胞 ◆ 鞭毛 ◆ 菌毛 1.荚膜 某些细菌在细胞壁外形成的一层特殊的粘液状物质，包绕整个菌体。 肺炎链球菌 肺炎链球菌 荚膜染色 10×100 菌体 荚膜 2.芽胞 破伤风梭菌 芽胞染色 10×100 某些细菌，在一定的环境条件下，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或椭圆形小体。 3.鞭毛 某些杆菌、所有的弧菌和螺菌菌体上附着的细长呈波状弯曲的丝状物，是细菌的运动器官。 伤寒沙门菌 鞭毛染色 10×100 三.1细菌涂片制作： 涂片----干燥-----固定 无菌操作 措施： 1、在酒精灯火焰10cm范围内操作 2、接种环使用前、后要烧灼灭菌 3、胶塞由拿接种环手的小指和小鱼际夹取 4、取菌前后试管口过火焰2~3次 三.2抗酸染色法（Ziehl-Neelsen） 用途：可鉴别抗酸性杆菌和非抗酸性杆菌。 方法：痰标本1环，涂匀，干燥——固定——5%石炭酸复红蒸染5分钟——水洗——3%盐酸酒精脱色1分钟—水洗——碱性美兰复染1分钟。 蓝色—非抗酸杆菌 结果： 结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸。 红色---抗酸杆菌（结核、麻风杆菌） 四、1鞭毛染色(变形杆菌) 1、取一滴菌液置于载玻片上（勿研磨），缓慢倾斜玻片，使菌液顺水流自然扩散，37℃温箱自然干燥（勿火焰固定）。 2、鞭毛染液，染色3分钟，轻轻水洗，吸干后镜检。 3、结果：菌体与鞭毛呈红色。 四、2芽孢染色 涂片 干燥 固定 5%石炭酸复红蒸染10分钟 水洗 95%酒精 脱色1分钟 水洗 碱性美兰复染2分钟。 吸干后镜检。 四、3荚膜染色（新型隐球菌） NS1D+新型隐球菌菌苔1环，涂匀+墨汁1滴 盖上盖玻片 高倍镜镜检 ? 实验报告 1、实验内容 2、涂片制作及抗酸染色步骤（简单的） 3、绘图（标明名称、放大倍数、染色方法） 基本形态（三幅）：反映单个形态、排列及染色性 特殊结构（三幅）：注明菌体和特殊结构