实验培养基制备.pptVIP

实验报告 1、实验内容 2、记录结果：如下表：（第二天中午） 表1：细菌在各种培养基中的生长现象 平板上生长的菌落特征 斜面培养基 液体培养基 半固体培养基 大小 颜色 表面（光滑或粗糙） 边缘（整齐或不整齐） 透明度（透明、半透明或不透明） 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 炭疽杆菌 枯草杆菌 类别 菌种 表2 ： 正常人体与环境中细菌的检查结果 结果\项目 空气 水 皮肤 咽 菌落计数 * 基础培养基 营养培养基 合成培养基 鉴别培养基 选择培养基 厌氧培养基 第二次实验 内容： 培养基的制备（操作） 2.高压灭菌器的使用 （示教） 3.细菌的人工培养（操作） 4.微生物分布检查（操作） 实验目的 1.掌握培养基制备的基本过程。 2.熟悉常用培养基的原理、种类及其用途。 2、pH：一般最适为7.０-7.6 ４、温度：一般最适温度为37℃ 1、营养物质 ３、气体 ①水 ②碳源 ③氮源 ④无机盐 ⑤生长因子 对O2要求 5、渗透压 细菌生长繁殖的条件 专性需氧菌 微需氧菌 兼性厌氧菌 专性厌氧菌 ★ 培养基 1、充足的营养物质 2、适当的PH值：7.0-7.6 3、无菌 概念 条件 　　指人工配制的适合细菌生长繁殖或积累代谢产物所需的营养基质。 555 ⑴ 基础培养基 ⑶ 选择培养基 ⑷ 鉴别培养基 ⑵ 营养培养基 ⑸ 厌氧培养基 1、根据用途分类 分类 ⑴ 基础培养基 可供大多数细菌生长。 基础培养基的制备过程 配料→溶化→测调pH值（7.6）→ 过滤→分装→灭菌（高压蒸汽灭菌） →无菌试验（37℃温箱18~24h） 121.3℃,103.4kPa ⑵ 营养培养基 在普通培养基（如肉汤蛋白胨培养基）中加入某些特殊营养物质（血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等）制成的一类营养丰富的培养基。供营养要求较高的细菌生长。 ⑶ 选择培养基 用于选择需要的目的菌。 在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要微生物的生长，有利于所需微生物的生长。 ⑷ 鉴别培养基 用于鉴定细菌。 利用不同类型微生物分解代谢产物的差异，用培养基产生明显的特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来。 图 SS平板 大肠杆菌 伤寒沙门菌 如糖发酵管。 ⑸ 厌氧培养基 专供厌氧菌分离培养和鉴定使用。 厌氧罐 厌氧手套箱 图 厌氧培养 2、根据物理性状分类 ⑴ 液体培养基 ⑵ 固体培养基：２-３%的琼脂 ⑶ 半固体培养基：0.2-0.5%的琼脂 液体培养基总量：500ML/室 (第1、2组完成) 制备过程： 营养肉汤 + 水 2.6 100 固体培养基总量：2400ML/室 (第3 、4、5、6、7组完成) 制备过程： 营养琼脂 + 水 4.2 100 固体斜面总量：3X100ML/室 (第8、9、10组完成) 制备过程： 营养琼脂 + 水 4.2 100 半固体总量：2X100ML/室 (第11、12组完成) 制备过程：半固体动力培养基 + 水 2.2 100 二、细菌的人工培养法 ◆ 无菌操作 ◆ 贴标签（接种人、接种物、接种时间） ◆ 37℃温箱培养18~24h ㈠ 液体培养基 增菌培养 沉淀生长 均匀浑浊 对照 表面生长 生长现象 ㈡ 固体培养基 增菌、保存菌种 斜面 平板 1、接种环与平板成30°~45°夹角，用指力或腕力划线 2、划线要连续、平行、密集，充分利用平板，分4~5区 3、划完1区要烧灼接种环 4、划后面区需从前面区连线 5、最后区不能和第1区交叉 分离细菌 1/10 1/5 单个细菌 菌落 菌苔 生长繁殖 连成一片 生长现象 菌落的特征：包括大小、颜色、边缘、透明度、表面、湿润度等 菌苔：指细菌生长繁殖后，在培养基表面形成的一层培养物。由菌落融合而成。 ㈢ 半固体培养基 观察细菌动力（有无鞭毛） 垂直插入3/4，原路返回，不能碰管底及管壁 对照 无动力 有动力 扩散生长 沿穿刺线生长 空气中的细菌检查 打开培养皿，置实验