血清白蛋白与药物小分子相互作用的研究方法.pdfVIP

2014年第07期 论著 饮食保健 血清白蛋白与药物小分子相互作用的研究方法 陈 晨 河北省邯郸市中心医院 河北 邯郸 056001 研究血清白蛋白与药物小分子相互作用常用的方法 2.5尧三维荧光 包括光谱法尧平衡透析法尧液相色谱法尧电化学方法尧X晶 三维荧光光谱是以激发波长尧发射波长和荧光强度为 体衍射等袁随着实验技术的日臻完善袁质谱尧核磁共振尧毛 坐标的三维空间图谱袁同时可用强度等高线描述被测组分 细管电泳尧激光散射等方法的应用也日益增多遥 下面主要 的分布和浓度袁不仅可以提高测量灵敏度和对分子结构的 介绍几种常用方法院 选择性袁而且能够更加全面地展现样品的荧光信息袁有利 1尧紫外-可见吸收光谱 于综合考查样品的组分分布及构型变化特征遥 紫外-可见光谱法是研究药物小分子与蛋白质相互作 3尧圆二色谱法 用的常用方法之一袁是各种光谱方法的基础遥 氨基酸残基 当高频变换的左旋和右旋偏振光作为入射光传播到 的微环境由蛋白质分子的构象决定遥 构象改变袁微环境改 物体上时袁若物体具有光学活性袁则两个圆偏振光的传播 变袁生色基团的紫外吸收光谱随之发生改变[1]遥若药物分子 速度就会不同袁 并且这两个偏振光被吸收的程度也不相 配体与生物大分子结合前后的吸收光谱有一定差异时袁也 同遥 当平面圆偏振光通过这些光活性的生色基团时袁光活 就是说当蛋白质的两个特征吸收峰的峰强或峰位发生了 性中心对平面圆偏振光中的左尧 右圆偏振光的吸收不相 变化袁说明蛋白质的构象发生了变化遥 同袁产生了吸收差值袁由于这种吸收差的存在袁造成了偏振 2尧荧光光谱法 光矢量的振幅差袁圆偏振光变成了椭圆偏振光袁这就是蛋 研究药物分子配体与蛋白质的相互作用袁荧光光谱法 白质的圆二色性遥 由于圆二色谱具有高度灵敏性袁所以可 是应用最广泛的一种方法[2]遥 该方法能够提供较多的荧光 以利用其来研究蛋白质立体结构的变化情况袁特别是研究 [6] 参数袁如激发光谱尧发射光谱以及荧光强度尧量子产率尧荧 稀溶液中蛋白质构象的一种快速尧简单尧较准确的方法 遥 光寿命尧荧光偏振等袁这些参数从不同角度反映了分子的 4尧电化学方法 成键和结构情况以及发光特性遥 当蛋白和小分子发生作用时袁蛋白或小分子的电化学 2.1尧荧光猝灭法 性质或光电化学性质发生改变袁通过这一变化袁可以检测 荧光猝灭法袁广义的定义是指任何可以使荧光物质的 他们两者之间的作用常数或确定其含量遥对于一些无法用 量子产率或荧光强度降低的作用袁但狭义的定义仅指荧光 紫外-可见尧荧光等光谱法来研究的体系袁却有可能用极谱 物质分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用引起的 法和伏安法等电化学方法进行研究遥 荧光强度降低的物理或化学过程遥很多过程可引起荧光猝 5尧红外光谱法 灭