高效液相法测定中兽药散剂中利巴韦林的不确定度评定.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 高效液相法测定中兽药散剂中利巴韦林的不确定度评定 林海丹1，余晓2，邓国东1，崔成富1，彭新宇3，陈志虹3 (1．广东省兽药与饲料监察总所，广州510230；2．广东药学院，广州；3．广东省农科 院兽医研究所，广州) 利巴韦林(Ribavirin)，又称病毒唑或三氮唑核苷，为广谱抗病毒药物，对多种病毒有抑制作用。 该药曾在畜物业和水产养殖业广泛应用，用于预防和治疗病毒性疾病。但作为人用抗病毒药移植兽用， 缺乏科学规范、安全有效实验数据，用于动物病毒性疫病不但给动物疫病控制带来不良后果，而且影响 国家动物疫病防控政策的实施…，同时不规范使用可导致动物中毒【21，在动物性食品中残留对人体具有 潜在危害，可引起变态反应和造血系统功能障碍1，因此农业部公告第560号已明文规定取消其在动物 疾病预防控制上的使用。本研究根据CNAS—GL06：2006《化学分析中不确定度的评估指南》【4】，对高 效液相色谱法测定中兽药散剂中非法添加的利巴韦林的检测进行不确定度的分析评定，对于合理地表征 测量结果的准确性，评价该项方法有重要意义。 l实验部分 1．1材料与测定方法 lent 仪器与设备高效液相色谱仪：Agl 1200型，配二极管阵列检测器，美国Aglient公司；电子天 平：CPA225D型，德国Sartorius公司。 标准品：利巴韦林对照品(100．0±0．1)％。 标准储备液配制： 瓶中，用超纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为2．5mg／mL标准储备液。用时稀释到所需浓度。 环境条件：温度(20±5)℃；相对湿度≤70％。 1．2实验过程 精确称取中兽药散剂2．5009(天平最大允许误差为±0．0019)，置具塞锥形瓶中，用移液管精密加 入50IllL超纯水，摇匀，超声15分钟，静置，过滤，取续滤液10¨L注入液相色谱仪，记录峰面积，外标 法定量。 2．数学模型 中兽药散剂中单位质量利巴韦林含量的计算式可表示为 式中，彳x．一样品提取液中利巴韦林的峰面积，；彳旷一标准工作液中利巴韦林的峰面积；co．一标准工作液 中利巴韦林的浓度，g／mL；y一提取液的定容体积，mL；m。厂样品的质量，g。 3．测量不确定度评估14’5l 3．1校准引入的不确定度 标准溶液，分别测定3次，得到相应的峰面积A(结果见表1)。 380 中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 表1．系列标准溶液的测量结果 1．00000)，在标准工作溶液中，利巴韦林的浓度为co时测量所产生的不确定度为： r5 U(C01⑥s／bl九 10 pg／mL @1．6856 其中： r标准溶液峰面积残差的标准差：6l一校准曲线的斜率；P=6(被测样品的测量次数)；力=18 一峰面积：c广一标准溶液浓度。 线性最／b乘法拟合曲线的前提是假定横坐标的量的不确定度远小于纵坐标的量的不确定度，因此 标准溶液中利巴韦林的浓度co不确定度计算程序仅仅与峰面积不确定度有关，而与校准溶液不确定度 无关，也不与从同一溶液中逐次稀释产生必然的相关性14]。故标准贮备液稀释成标准溶液所产生的不确 定度可以忽略计算。所以：Ⅳ。(c0)⑥6．28M0。。 3．2利巴韦林标准储备液浓度引入的不确定度 4-0．1)％，因此，纯 (1)标准物质纯度引入的不确定度坂尸利)。按供应商目录所给纯度为(100．0 度引入的标准不确定度u(p辅)=o．001／43=o．0005774；Ur,l(P荆)=5．774x104。 (2)标准物质称量引入的不确定度 检定证书给出了天平的最大允许误差为4-0．1mg。标准分量应重复计算两次，一次是空盘，另一次 为毛重，因为每一次称重均为独立的观测结果。由此得到标准物质质量朋利的标准不确定度“m捌)为：