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2015-09-09 发布于重庆
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植物血凝素的制备方法.pdf

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中国试剂网 2.5.54 植物血凝素的制备方法植物血凝素也称为植物凝集素（PHA ），可自制也可购自商品。自制的方法常用生理盐水提取法。（A ）干品制备法（1）选广东鸡子豆 10g，用蒸馏水冲洗，置培养皿内用 75%酒精一次性浸洗，倒掉酒精留间隙置 37℃。恒温箱内24-48 小时；（2 ）在无菌条件下研碎鸡子豆，加生理盐水 30ml，摇匀后放入 4 ℃冰箱 24 小时，第二天再加生理盐水 70ml，再置 4 ℃冰箱内 24 小时。每 8-12 小时摇荡一次。（也可一次性加 100ml 生理盐水）；（3 ）无菌条件下移入 10-50ml 离心管内，3000-4000rpm30 分钟。在无菌箱内把上清液分装于 10ml 小瓶，置冰箱冷冻层备用；（4 ）效价：外周血染色体制备每 100ml 培养基加 PHA 约 2ml 。注：若整个过程未在无菌条件下进行，分装时用 G5 玻砂漏斗除菌即可。（B ）鲜品制备法：（1）选择完整无破皮鲜菜豆 20g ，用 75%酒精浸泡 10 分钟；（2 ）在净化工作中用无菌盐水或蒸馏水漂洗二次，然后置无菌乳钵中捣成糊状，用 100ml 无菌盐水浸泡封口；（3 ）移入 4 ℃冰箱中置 24 小时，中间摇动数次，次日 3000rpm30 分钟，在无菌情况下分装上清液于 10ml 小瓶内，置冰箱冷冻层备用。（4 ）效价：正式使用前先用一定量作效价测定，按效价使用。