miR1395p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证.pdfVIP

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2015-09-04 发布于浙江
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miR1395p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证.pdf

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中国药理学通报　 Chinese Pharmacological Bulletin　 2015 Jan;31(1):127~30 ·127 · 网络出版时间:2014-12-4 13:45　网络出版地址:http:/ / / kcms/ doi/ 10.3969/ j.issn.1001-1978.2015.01.027.html miR-139-5p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证 1 2 1 1 姜　嫄 ,黄卓君 ,强兆艳 ,吴艳娜 (天津医科大学1.药理学教研室,2.基础医学院,天津　 300070) doi:10.3969/ j.issn.1001-1978.2015.01.027 荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量 PCR检测慢病文献标志码:A 文章编号:1001-1978(2015)01-0127-04 毒感染后H9c2 细胞中miR-139-5p 的相对表达量。结果　中国图书分类号:R-332;R322.11;R342.2;R373.9;R394．2; 成功构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,病毒感染 H9c2 细 R542．2 胞的效率超过95%,miR-139-5p 表达明显减少。结论　成摘要:目的　构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,检测其在功构建了miR-139-5p低表达慢病毒载体,包装的病毒可在 H9c2细胞的表达效果。方法　根据大鼠miR-139-5p序列, H9c2细胞中实现抑制miR-139-5p表达的效果。设计合成其靶点序列,并合成寡核苷酸双链,克隆入慢病毒载体pGC-LV,与pHelper 1．0 和pHelper 2．0共转染293T 细关键词:miR-139-5p;慢病毒载体;H9c2 细胞;感染;qRT- 胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染 H9c2 细胞。 PCR;低表达收稿日期:2014 -09-25,修回日期:2014 -11-09 　　 MicroRNAs (miR)是一类内源性非编码单链基金项目:国家自然基金项目(No;天津市自然科学基金 RNA,通过结合靶基因mRNA 的3′非翻译区(3′- 资助项目(No 11JCYBJC14900);天津市高校国家级大学 UTR),介导靶基因mRNA 降解,调控转录后基因表生创新创业训练计划项目:201310062007 [1] 达 ,进而参与体内各系统生理及病理过程。心血作者简介:姜　嫄(1990 - ),女,硕士生,研究方向:心血管药理学, 管研究表明,miR 密切参与调节血管生成、心脏发 E-mail:438001632@; 吴艳娜(1974 -),女,博士,副教授,研究方向:心血管药育、心力衰竭、缺血/ 再灌注(ischemia-reperfusion,I/ 理学,通讯作者,Tel:022E-mail:yanna_wu@ R)损伤等病理生理过程,并可能是其中的关键性调 [2] 126.com