UPLC-MS%2fMS法同时测定家兔血浆中6个黄酮类成分及药代动力学的研究.pdfVIP

2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 2，2质谱条件雾化器压力：207kPa；干燥气流：12 mL·rain一；干燥气温度：350℃；碰撞电压：1．0V；正负 离子扫描模式。 2．3供试品溶液的制备取生脉注射液20mL，通过AB一8大孑L树脂 大孑L树脂10 g，直径1．5cnl ，用 25％乙醇150 mL洗脱，弃去洗脱液，继用95％乙醇150mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶 解，即得…。 子甲素、五味子乙素，五味子酯甲适量，以甲醇制成浓度均为0．2mg·mL。1的混合对照品溶液，即得。 2．5方法学考察 2．5．1精密度试验取同l份供试品溶液，按“2．1”项下条件连续进样6次，测得其各共有峰相对保留时间 和相对峰面积的RSD均小于3．0％，表明精密度良好。 2．5．2重复性试验取同一批样品6份，按“2．3”项下方法制备供试品溶液，按“2．1”项下条件分别进样， 测得其各共有峰相对保留时间、相对峰面积的RSD均小于3．0％，表明重复性良好。 2．5．3稳定性试验取同一份供试品溶液，按“2．1”项下条件分别在0，2，4，6，8，12，24h进样测定，其共有 峰相对保留时间、相对峰面积的RSD均小于3．O％，表明供试品溶液在24h内稳定。 2．6实验结果 2．6．1生脉注射液UPLC指纹图谱取8个生产企业的生脉注射液的供试品溶液，分别按“2。1”项下条件 进样，采用国家药典委员会颁布的指纹图谱2．0软件进行分析，结果见图1、表l 图、表略 。实验结果表明， 采用mark峰匹配计算生脉注射液指纹图谱相似度，8个生产企业的相似度除2个企业外均高于0．9，且8个 6．50％，9．09％，3．97％，3．68％，均小于10％。 2．6．2生脉注射液UPLC色谱图主要色谱峰指认 采用离子阱Auto正负离子扫描模式，对生脉注射液UPLC特征指纹图谱所标示的主要色谱峰进行质谱 确认，主要成分的分子离子及碎片离子如表2所示，将主要成分的色谱行为、结构信息结合对照品及文 献心“叫推测为18个成分。见表2、图2 图、表略 。 3讨论 3．1 UPLC指纹图谱的建立是以生脉注射液HPLC指纹图谱的建立…为基础进行条件优化，将原有的90 rain。经实验发现，指纹图谱前6rain流动相变化直接影响人参皂苷Rg，和Re的分 rain指纹图谱缩短到25 离，因此最终将条件优化为：0—4．17rain时20％A越2％A，4．17～4．79 rain时23％A—口8％A。 rain内即可实现生脉注射液中大部分成 3．2与常规液相色谱方法比较，本文所建立的UPLC分析方法在25 分的有效分离，显著缩短了分析时间，节省溶剂。进样量由常规的10弘L减少至1此，实现不经分流直接与 质谱相连进行测定。本文所形成的UPLC对照指纹图谱具有～定的代表意义，通过与质谱联用，可对一些含 量较低的成分进行确认，如人参皂苷Rh，、F。／Rg。、Rs。／Rs，，可以有效控制产品质量并发现问题。 参考文献 略 本文发表于 药物分析杂志》2012，32 10 ：1813 UPLC—MS／MS法同时测定家兔血浆中6个黄酮类 成分及其药代动力学研究 黄勇，何峰，郑林，张治蓉，兰燕宇，王永林 贵阳医学院药学院，贵阳550004 摘要目的：建立uPt￡一MS／MS同时测定家兔血浆中注射用复方荭草冻干粉针的6个黄酮类化合物 异荭草素，荭草素，牡荆素， 2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 一215一 灯盏乙素，木犀草苷，槲皮苷 的分析方法，并计算其在家兔体内的药动学参数。方法：血浆样品酸化后以甲醇沉淀蛋93；色谱采用 BEH 1 WatersC．。 2 nllrnxS0—姗，1．7IIm 色谱柱，流动相为乙腈一0．1％甲酸水溶液，梯度洗脱，质谱采用多反应监测 MRM 进行正 离子检测，样品分析时间为3．5rain。结果：6个黄酮类成分在家兔血浆中呈良好线性关系，提取回收率在79．4％～1晒．9％之间，日 内、剐司精密度和准确度良好，各检测成分的方法回收率分别为异荭草素96．8％～110．1％，荭草素85．8％～98．8％。牡荆素陋O％。 2％。6个黄酮类成分在家兔体内的平均滞留时 110．6％，灯盏乙素弧7％一102．5％，木犀草苷84．1％～93．8％，槲皮苷96．5％～llZ 间均较短，在16min以内。结论：该方法特异、快速、灵敏，可用于注射用复方荭草冻干粉针的药代动力学研究。 关键词：生物样品；中药复方注射剂；黄酮；异荭草素；荭草素；牡荆素；灯盏乙素；木犀草苷；槲皮苷；药代动力学；超高效液相色 谱一质谱联用 UPLC—MS／MSsimultaneousdetermin