绿色植物中色素的提取与色谱分离.pdfVIP

厂 增 杭州师范学院学报 1998年4月 OFHANGZHOUTEACHERSCOLLEGEApr．1998 刊 JOURNAL 绿色植物中色素的提取和色谱分离 陶 兰 张华松 王德琳 潘建林顾一新 眈州师范学院化学系杭州310036) 摘要缘色植物中合有叶绿素、叶黄素和胡萝P素。最史应用微型化学实验仪器，对绿色植物中 的色素进行提取和色谱分离． 关键词色素，提取．色谱，分离 绿色植物中色素的提取和分离是色谱技术应用于分离有机化台物的经典实验之一。绿色植物的茎、 叶中含有胡萝h素、叶黄素和叶绿素。胡萝}索c。。Hs6_右三种异构体，即a一、p一和7～胡萝}索，其中p一 体含詹最多，也最重要。p一{奉具有维生索A的生理活性，亦称维生索A元。叶黄素c”H“o。是早从蛋黄 生物与金属镁的络合物．是植物光合作甩所必须的健化荆。本文在经典实验方法的基础上，应用微型化 学实验仪器．通过选择1i同的层析淋洗剂和展开剂，将微型色谱柱与薄层色谱结合进行色素分离。实验 手段简便易行，取样量小，试剂耗用量及分离H{间大为减少。 淤批 维生素A 、， 丫＼1 f／、7吣氏扒／V、飞分∥哙／ ＼人 $一胡萝j，素 l 实验部分 1．1试剂与仪器 绿色植物叶，95％乙醇、石油醚(60～90C)、丙酮、苯：分析纯，硅胶G(青岛)，投甲基纤维索铺。 微型化学实验仪器及一般有机化学实验仪器。 1．2实验 1．2．10·5％旋甲基纤维紊钠水溶液的配制 取0．5g羧甲基纤维素钠于250ml烧杯中，加入 100ml水，加热使长时问微沸直至完全溶解，冷却后补足100ml水，静置过夜。取上清液备用。 1．2·2 薄层板的割备在10mlo．5％的羧甲基纤维索钠水溶液中逐渐加入约5 g的硅胶G，边加 边搅拌，调至均匀糊状而无气泡，用微型吸管取适量糊状物(每块板约需硅胶GO．6～0．7g)滴注在洁净 干燥的小玻片(2．5×7．5 cm)上轻轻摇匀后，对角楗敲，婕表面均_匀。自然风干后，110c下烘1h，取出后 置于干燥器中冷却备用。 t 增刊 陶兰等：绿色植物中色素的提取和色谱分离 113 1．2．3 色素的提取取2g新鲜的菠菜叶于研钵中捣烂．用12ml的石油醚：乙醇=2：1的混台溶 液分三次浸取色素，浸取液过滤后转入微型分液漏斗，用等体积的水洗涤三次，有机层经无水硫酸钠干 燥后转入微型锥型瓶中密封避光咀备下一步实验。 1．2．4 色素的柱色谱分离 用直径1em．长约I5em的玻璃滴管作为色谱桂．以少量脱脂棉塞于 滴符下端细处．上铺5nim的层析用硅胶，称取5g薄层层析用硅胶H·以16ml石油醚调成糊状液后加 入柱中．低压操作使硅胶均匀压实，加入一半色索试样(1、2、3)，以石油醚：丙酮二9：l为淋洗制分出前 ～橙黄色带即胡萝h索，淋洗刷用量约20ml；以石油醚：丙酮=7；