薄层色谱分析主要影响因素.pdfVIP

Part 薄层色谱分析的主要影响 因素 一、样品的预处理及供试液的制备 一捻金中人参二醇和人参三醇的鉴别 左：稀酸水解后氯仿萃取，受大黄中成分的干扰，无法辨认 人参二醇和人参三醇。 右：过氧化铝小柱 八珍丸中甘草的鉴别 左：未处理 右：过硅烷化硅胶小柱 1.脱脂后甲醇提取，直接 点样。 2.正丁醇萃取 3.过氧化铝小柱（40 ％甲 醇洗脱）后，正丁醇萃 取，提取液蒸干，甲醇溶 解 4.人参对照药材 5.甘草对照药材 参苓白术散中人参和甘草的鉴别 样品供试液净化的方法 w单一溶剂萃取法 w分段萃取法 w液液萃取法 w 固液萃取法 氧化铝小柱、聚酰 小柱、硅烷化硅胶小柱 等 二、薄层色谱的上样技术 w要求原点＜3mm，否则分离数SN太大。 w溶解样品的溶剂具有洗脱能力，样品在原点 位置环形展开 —“上样环形色谱效应” w供试液溶剂在原点的残留 改变展开的选 择性 w上样时对薄层板的机械损坏 三、吸附剂活性与相对湿度对薄层色 谱的影响 厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的鉴别 不同湿度下赤芍和白芍的鉴别 左图：湿度32 ％，右图：70 ％ 相对湿度的控制方法 w有的种类要求不严格：30 ％～70 ％即可。但 为了实验具有良好的重现性，应记录实验时 的相对湿度。 w控制方法：将双层展开槽中的 侧加入 定 浓度的硫酸，将点好样的薄层板放入另 侧 槽中，密闭15～30分钟后，再加入展开剂展 开。 湿度与硫酸浓度关 不同湿度对苍术正己烷提取物薄层行为的影响 四、溶剂蒸气在薄层色谱中的作用 薄层色谱与柱色谱的区别之 就是溶剂 的蒸气相在展开箱中也参与色谱展开而形成 三维的层析过程。展开箱的气体空间在层析 过程中起着重要的作用。 通常所谓的“展开箱饱和”应该严格区分以 下几种情况： (1)展开箱饱和；是指展开前及展开中溶剂系统中所有 组分在展开箱的整个气体空间达到平衡，即达到饱 和状态；但在日常的实践中．较少需要在“饱和”状 态下展开，而只需用展开剂(或规定的溶剂)的蒸气 在展开箱中预平衡 定的时间，即“预平衡”。 (2)预吸附：通常是指薄层板的干燥板面(即未被溶剂 湿润的部分)对展开箱率问气体分子的任何程度的吸 附，即通常所谓的“顶饱和”。 (3)吸附饱和：是指薄层板的未被溶剂湿润的部分与 展开箱的饱和气体空间达到平衡状态，即“完全饱 和”，这是预吸附的极限状态。 (4)毛细管饱和：是指薄层板所有的自由空隙借毛细 管的作用被溶剂充满的过程，即相当于展外完成后 的状态。 w 饱和的情况与展开箱的类型有关，常规的平底展开 箱在展开前较难达到展开箱饱和，所以普通的做法 是在内壁加贴与之等宽等高的用溶剂湿润的滤 纸．有 于达到饱和。用双槽展开箱在其 侧槽中 加溶剂可以较容易地达到吸附饱和及展开箱饱和。 如用夹心式展开箱，由于箱内空间间很小，展开前 因为空间没有溶剂分子、而且很难有空间扩散，所 以实际上是非饱和的。在这种非饱和的夹心式展开 箱中薄层板不产生预吸附现象。通常误认为夹心式 展开槽空间小