PRRSV国内流行毒株的分离鉴定和结构基因的分析.pdfVIP

动物医学进展 ,2008 ,29 (6) :4350 Pro gre ss in Vet erinary Medicine P R R SV 国内流行毒株的分离鉴定及结构基因的分析 马 　平 ,石文达 ,刘永刚 ,蔡雪辉 ,王洪峰 ,王淑杰 ,李成君 ,张 　琪 ( 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 　兽医生物技术国家重点实验室 　猪传染病研究室 ,黑龙江哈尔滨 15000 1) ( ) 　　摘 　要 :从国内发病猪场采集的猪繁殖与呼吸综合征 PRR S 病料中 ,分离到 8 株猪繁殖与呼吸综合征 ( ) 病毒 PRR SV 。病毒分离培养表明 ,J S1～J S5 第 1 代即可适应 Marc145 细胞 。GD 1～GD3 经 Marc145 细胞 3 次～4 次传代后出现明显的细胞病变 。间接免疫荧光试验表明 ,8 个分离毒株与抗 PRR SV 抗体均可 出现特异性的胞浆荧光 。它们对氯仿 、甲醛 、酸和碱均敏感 。5溴2 ′脱氧尿核苷对其无抑制作用 。参照 GenBank 中已发表的 PRR SV 的序列设计了两对特异性引物 ,分别对所分离毒株进行部分 n sp 2 基因和结构 基因的扩增 。发现J S1～J S5 n sp 2 基因发生了部分缺失 。选择J S1 、J S5 、GD3 进行 n sp 2 基因和结构基因的 扩增和测序 。序列分析结果表明 ,J S1 、J S5 和 2006 年以后国内分离到的高致病性 PRR SV 高度同源 。GD3 的N sp 2 基因虽然没有发生第 534 位～第 562 位氨基酸的缺失 ,但与2006 年以后分离的毒株一样 ,发生了第 482 位氨基酸的缺失 。通过对 3 个分离毒株与其他国内分离毒株的结构基因序列进行系统进化分析发现 , 我国的 PRR SV 流行毒株可大致划分为两个亚型 ,J S1 、J S5 、GD3 、C H1a 、J XA 1 、HU N 4 、SH H 等属于一个亚 型 ,BJ4 、CC1 属于另一个亚型 。亚型间核苷酸序列同源性为 9 1. 2 %～9 1. 8 % 。 　　关键词 :猪繁殖与呼吸综合征病毒 ;流行毒株 ;分离 ;鉴定 ;结构基因 ( ) 中图分类号 :S852 . 659 . 6 文献标识码 :A 文章编号 2008 ( ) 　　猪繁殖与呼吸综合征 Porcine rep ro ductive an d tive and re spiratory syn dro me viru s , PRR SV 是有 ) re spiratory syndro me , PRR S 是猪的一种重要的病 囊膜的单股正链 RN A 病毒 ,属于动脉炎病毒科动 毒性传染病 ,主要以母猪发热 、厌食 、流产 、死产 、木 脉炎病毒属 ,基因组全长约为 15 kb ,含有 9 个开放 ( ) [46 ] 乃伊胎 、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和