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泸州医学院学报 年 第 卷 第 期 2010 33 4 Journal of Luzhou Medical College Vol.33 No.4 2010 367 论著 不同细胞裂解液提取总蛋白 在免疫印迹中的效果分析* 王 丽，张永亮，何 涛，李 娟，刘晓燕 （泸州医学院医学分子生物学实验室，四川泸州 646000 ） 摘 要 目的：寻找一种适合乳腺癌细胞MCF-7 蛋白提取的裂解液配方用于免疫印迹分析。方法：配制两种不同的细胞裂 解液 与 ，分别对培养的密度相当的人乳腺癌细胞 进行总蛋白的提取， 法测蛋白含量，聚丙烯酰胺凝胶电泳 A B MCF-7 Bradford 对蛋白进行分离，免疫印迹法检测 和 的表达，比较 种裂解液裂解效果。 结果： 种细胞裂解液均可 (SDS) β-actin Twist 2 2 满足免疫印迹分析的要求， 液提取的蛋白含量虽比 液高，但 液用于免疫印迹检测 和 的效果更佳。 结论：免 B A A β-actin Twist 疫印迹分析结果显示： 细胞裂解液（ ， ， ， ， ，临用前加入 A 50 mM pH 7.4 Tris-HCl 150 mM NaCl 0.1% SDS 1% NP-40 1 mM EDTA PMSF 使终浓度为 1mM）可作为提取乳腺癌细胞MCF-7 中蛋白的一种理想配方。 关键词 细胞裂解液；蛋白提取；免疫印迹； MCF-7 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） Q533 A 1000-2669 2010 4-0367-03 THE EFFECT ANALYSIS OF DIFFERENT CELL LYSATE ON TOTAL PROTEIN EXTRACTION IN WESTERN BLOT Wang Li, et al Laboratory of Medical Molecular Biology, Luzhou Medical College ： Abstract Objective To search a suitable cell lysate for extraction of proteins from human breast cancer cells MCF -7 for Western blot．Methods:The proteins were extracted from human breast cancer cells by two different cell lysates: A and B. Then total proteins
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