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20),以有AID不良结局妇女为病例组 (n=75),其中,实施≥4次AID均失败的对象25例 (反复失
败组),发生生化妊娠对象25例 (生化妊娠组),实施AID后妊娠12周内曾发生胚胎停止发育或自然
流产对象25例 (胚停流产组)。收集所有对象外周血,采用密度梯度离心法分离单个核细胞,一部分用
三荧光标记染色 (APC-CD3,FITC-CD16,PE-CD56单克隆抗体),流式细胞技术检测总淋巴细胞群中
CD56+,CD56+CD16+,CD56+CD16-NK细胞亚群数目;另一部分单个核细胞 (效应细胞)与
CFSE标记的K562细胞 (靶细胞),以效应细胞比靶细胞为50∶1的比率在37℃、5%CO2培养箱共孵
育3h,再以碘化丙锭(PI)染色,避光10分钟,采用流式细胞技术检测K562细胞死亡数,并分析
NK细胞活性[按 (靶细胞死亡率一靶细胞自然死亡率)/(100—靶细胞死亡率)×100%计算]。结果
助孕方对改善子宫内膜容受性的实验研究
杨 菁 余 楠 尹太郎 闫文杰 郭 悦
武汉大学人民医院 生殖医学中心(430061)
目的 研究中药助孕方对促排卵小鼠和胚泡着床障碍小鼠妊娠率和着床胚泡的影响,并研究其对着
床窗期子宫内膜容受性标志物胞饮突、白血病抑制因子(Leukaemiainhibitoryfactor,LIF)、整合素
β3、雌孕激素受体表达的影响。方法 选择6-8周龄昆明小鼠,让其同笼交配,将妊娠小鼠随机分成正
常组、促排卵组、促排卵十中药组、着床障碍组、着床障碍十中药组和中药组六组。记录妊娠第8天
(Pd8)各组小鼠妊娠率和着床胚泡数,采用扫描电镜观察各组小鼠在Pd4晚22时 (第1时间点,T1)
和Pd5上午10时 (第2时间点,T2)共两个时间点子宫内膜胞饮突的表达,并采用免疫组化和Real
Time-PCR技术观察各组小鼠着床窗期白血病抑制因子、整合素β3和雌孕激素受体的原位表达和其
mRNA的表达。
碍模型的胞饮蚕
小鼠的子宫内膳
miR-181a通过激活素受体2a抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖
张 群 张连筱 颜桂军 孙海翔 胡娅莉
南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科(210008)
目的 探讨miR-181a对小鼠卵巢颗粒细胞(mGCs)增殖能力的影响及其相关机制的研究。方法
通过重组腺病毒介导的miR-181a过表达及miR-181ainhibitor介导的抑制表达结合细胞增殖试剂盒Cell
CountingKit-8(CCK-8)、实时定量PCR(Q-PCR)和WesternBlot实验,阐述了miR-181a对小鼠卵巢
颗粒细胞增殖活性的影响;同时通过荧光素酶报告基因、Q-PCR以及WesternBlot实验,发现miR
181a靶向作用于激活素受体2a(acvr2a);最后通过CCK-8实验证实miR-181a调节激活素A(activin
A)参与对mGCs增殖的调控。
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