毕赤氏酵母的植酸酶工程菌高密度培养条件研究.pdfVIP

生产制备技术与嗣箭研究论文 全国第六届工业生化学术会议(1999，福建)论文集 毕赤氏酵母的植酸酶工程菌高密度培养条件的研究 奈雪冰黄鹭强郑教施巧琴是松刚 (福建师范大学生物工程学院，福州350007) 摘要：表文研完了毕赤氏酵母植酸酶工程菌高密度生长的培养奈件， 包括不同碳 源、酵母粉、 蛄果是：甘油4 (NH。)。SO,．KH。PO，等不同用量列菌休生长的影响。 ％，蛋白胨2％， 酵母粉0．5％， 【Nit。)。SO。0．8％，K。珊O。0．1％，KH2PO。0．6％ 。在此基础上，对盈度、起始pH、接神量等影响该工程菌菌体生长的因紊也作了初步 研究． 关键词：毕赤氏酵母，植酸酶，高密度培养 七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋[E：1(SCP)，有很好的发酵基础，葡体高密 度培养获得较大的成功…。近来巴斯德毕赤【毛酵母1_=三被发展成为收县潜力的酵母灰达系统2。 它既具有真核生物蛋白翻译后加工能力， 又拥有缘桉生物易于培养、繁殖快．操作简便等特点． 许多具有商业价值的外源蛋向在此系统中得到了成功的表达”“ 机酸酶是分解植酸及奠镛菱的 一种磷酸酯酶， 添加f-贫箭，与饲料巾，可消除单胃动物因不能分解檀酸而引起的抗营养作瞩，提 高机体对蛋白质及多种澈量元素的和用率． 同时，降低粪便叶1磷的含最，减少环境中磷的i}}{累托 染。国外对微生物产植酸酶的研究已有30多年的历史j一… 本文研究丫一株毕赤氏酵母的产植酸酶1．程菌生长阶段的商密度培养条件，th于用恢1．栈菌 原有的培养条件。所获得的菌体密度太低(、平均OD值仪为12)，发酵液总效价不高。1日此，挺 高薷体生长阶段的茁体衙度成了提高瑶表选系统袤达水r的条必要途弪。 删将研究结粜报导如 下． I材料与方法 (略)． 2结果与讨论 2．1各种碳源对菌体生长的影响 ● 用不同碳源替代基础培养基中的甘油，筛选最佳碳源； 刚基础培养基培养菌体作为对照，结 果表明H油对菌体／6J啻tttK作用最大．见刚l、图2。从图2nJ以看出，随着培养基中甘浦用量的 增大，菌体密度迅速递增，甘油浓度以5％时菌体长势最好，fH考虑到过高的碳源造成培养基C，N 比的失衡。对产酶不利，因此，将甘油的晟佳浓度拟定为4％。 2．2氮源试验 2．2．1不同浓度的(枣rH。)。SO。试验 在碳源试验的基础上，试验不同浓度的(NH。)：SO,对蔗f体屯长的影响：所得结果见图3。表 ～362— 生产制备技术与制剂研究论文 全国第六届工业生化学术会议(19的，福建)论文集 明：在一定的浓度范…内， f 随着(NH。)。SO。浓度的提高，菌体浓度增大．NH；)：SO。浓度为 4％之间菌体OD值变化不^：。 0．8％时，菌浓最高， NH．)。SO。浓度在0．8一l 2．2．2不问量酵母粉d。嘧 用不同浓度的酵{j粉代替基础培乔菸q·的酵母粉对菌{年7卜长的影响，结果咐．图4从罔4可知 酵母粉对菌休生长影引f艮大， 在一定的范喇内，随着酵母粉用量的提高，菌J本密度递增。当酵母 粉含量为0．5％时．菌，h长势最好。 50 相40 80 对30 ：6t， 譬20 酶40 (％)1。