血管内皮生长因子过度表达促进恶性黑素瘤细胞增殖机制研究.pdfVIP

102 China J Lepr Skin Dis. Feb 2006 ,Vol. 22 ,No. 2 ·论著· 血管内皮生长因子过度表达促进恶性 黑素瘤细胞增殖机制研究 1 1 1 2 陶 　娟 　涂亚庭 　林 　云 　沈关心 ( ) ( ) [摘要] 　目的 : 　研究血管内皮生长因子 VEGF 过度表达促进恶性黑素瘤 MM 细胞增殖的机制。方 法 : 　通过电穿孔法将 VEGF165 cDNA 转染至 MM 细胞系 A375 中 ,细胞计数法、MTT 法和酶联免疫吸附 ( ) 实验 ELISA 法分别检测 A375 细胞体外增殖效应和其分泌的 VEGF 蛋白水平 ,化学比色法和蛋白印迹 ( ) ( 法 Western Blot 分别检测转染前后的 A375 细胞合成的诱导型、内皮型、神经型一氧化氮合酶 iNOS 、 eNOS、nNOS) 的活性和蛋白表达。结果 : 　转染 VEGF165 cDNA 后 ,A375 细胞明显增殖 ,其分泌的 VEGF ( ) 在转染后 72 h 、96 h 明显增加 P 0. 01 ,其合成的 iNOS 的活性和蛋白表达在转染后48 h 、72 h 、96 h 明 ( ) 显升高 P ≤0. 05 ,但在转染前后未检测到 eNOS 和 nNOS 的活性及蛋白表达 ,一氧化氮合酶抑制剂L - NAME 呈剂量依赖性地抑制转染 72 h 后的 A375 细胞增殖活性。结论 : 　iNOS 可能在 VEGF 过度表达 促进 MM 细胞增殖中发挥重要作用。 [ 关键词] 　血管内皮生长因子 ; 　恶性黑素瘤 ; 　增殖 ; 　一氧化氮合酶 Mechanism of malignant melanoma cells’proliferation enhanced by over - expression of vascular endothelial growth factor Tao Juan , Tu Yating , lin Yun , et al . Department of Dermatology , Affiliated Union Hospital , Tongji Medical Col lege , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan , 430022 [ Abstract ] 　Objective : To investigate the mechanism of malignant melanoma cells’proliferation enhanced by the over - expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) . Methods : VEGF165 cDNA was transfected into ma lignant melanoma cell line A375 by electroporation. A375 cells’proliferation in vitro and VEGF protein level were detected by cells