聚腺嘌呤核苷酸金电极上的吸附氧化.pdfVIP

维普资讯 化学学报 ACTA CHIMICA SINICA 1995，53，45O～454 一 聚腺嘌呤核苷酸在金电极上的吸附氧化 ． ／ I 高小霞 垃 ~ k—1．f方 晔, ． 摘要 采用微 电极循环伏安法和吸附转移济出伏安法研究了单链多聚腺嘌呤核苷酸P0ly(A)在金 电极上的伏安千亍为．重点考察了Poly(A)曲吸附和氧化过程 发现PolyfA)分子在盒 电极表面能 够形成多种状卷的特性吸附．影响吸附态知吸附强度的主要困素是吸附电势，吸附时间和溶液浓 度．在负电位区．随着吸附时间 “)的变化，Poly(A)分子在盒电极表面发生不同状态的以腺瞟 岭碱基为吸附位点的强吸附，这种以腺原呤碱基吸附的PolyfA)分子能够在零伏附近给出很强的 氧化电流峰和对应的还原峰 关键词棱酸，堂皇极，煎至垡塞 良赔垂 卡髫 金、雹秘 核酸对生物遗传和蛋白质生物合成皆有重要功用，研究核酸大分子的结构、性能及其相 互作用是 了解生命过程的重要任务，由于核酸分子与荷电生物表面 (例如细胞膜)的相互作 用是实现基本生命过程的重要环节 ，使得核酸与电极表面 (生物表面模型)相互作用的研究 具有重要的理论意义和应 用价值．近年来．有关核酸在汞 电极上的电化学行为的研究取得了 很大进展 ，对某些核酸分子在汞 电极上的吸附和氧化还原过程获得 了一些规律性的认识 已研究过的核酸分子主要有小牛胸腺 DN 、变性DNA、多聚核酸 和寡聚核酸 等．但 是，由于汞电极电位窗口的限制，已报道的研究工作大都限于较负的电势范围，而有关核酸 阳极氧化过程的研究还较少报道 由于核酸分子在正电位区的吸附较弱，主要通过带负电荷的磷酸靠静电作用来维持吸 附．这种弱吸附分子的氧化反应常发生在较正的电势位置 1．0V)，而且 电流响应也很不灵 敏 f．所以，用常规方法常常难以获得核酸氧化过程的伏安曲线．为了克服这一困难，我们 采用金 电极在负电位区吸附然后在正电位区扫描的方法，获得了以碱基作为吸附位点的强吸 附P0 (A)分子的氧化电流峰、即使在电极面积很小的微电极上也能计录到在零伏附近 的 很强的电流响应信号．本文对这一伏安行为的某些特征作了初步的讨论． 1 实验 I．1 主要仪器和试剂 PAR175信号发生器 YEW3033X—Y记录仪 (四川仪表 四厂)： 自组装微 电流测量仪． Poly(A) 均聚合度：2o0～300(碱基)，Sigma化学公司】．其他试剂均为分析纯 Poly(A) 水溶液的浓度 测定 在 HitachiUV-3200分光 光度计上进行，吸光系数为 9800cm (oto| base／L)～(258nm)，所有溶液均以无菌水为络剂的缓冲溶液 (0．02mo／’dm nro~一／ 993flZl1~1日收到·修改稿于l994年2月28日收到一北京大学青年科学基金资助项目 维普资讯 化学学报 ACTA CHIM ICA SINICA 1995 ·45l· H2PO4 pH=71)配制而成 ．实验在冰水浴 中进行 (～4℃)． 1．2 擞电极方法 分别采用常规循环伏安法在本体溶液 含【Poly(A)1和吸附转移优安法在背景溶液 不【含 Poty(A)I中进行伏安扫描 除特殊说明外，本体溶液中Poty(A)浓度均为 5x10-amo’dni-3， 扫描速度为200mV ‘s～ 为了简化实验装置和节省实验试剂，本文的电化学实验均在金微 电极上进行．金微 电极的制备：将半径 r=[2pm 的金丝尾端锡焊在镍丝引线上，前端烧封 于软玻璃管 中，然后磨出并抛光 电极前端，引出线用环氧树脂密封 经 K Fe N 稀溶液 稳态极化 曲线法矫正出电极准确尺寸为 =2