茶树黄酮合成酶Ⅱ基因全长cDNA序列的克隆与实时荧光定量PCR检测.pdfVIP

2009年中国作物学会学术年会 茶树黄酮合成酶II基因全长cDNA序列的克隆 和实时荧光定量PCR检测 乔小燕L2马春雷2陈亮2 (1广东省农业科学院茶叶研究所，广州510640： 2中国农业科学院茶叶研究所茶树资源与改良研究中心／国家茶树改良中心，杭州310008) 茶叶中含有丰富的类黄酮化合物，是公认的具有保健功效的无酒精饮料。黄酮类是类黄酮 中具有独特药理学功效的一类，其抗癌、抗肿瘤作用优于其它的类黄酮化合物。黄酮合成酶基因 II(FSII)是催化黄酮合成的关键酶，并且在进化上具有很强的保守性。因此，分离克隆茶树黄 酮合成酶II基因，分析该基因在不同茶树种质资源中的表达，可以为茶树遗传改良、演化和分类 研究提供理论支持。本论文主要研究结果如下： 1．根据在NCBI上登录已发表的FSII基因氨基酸保守区和密码子偏好性设计兼并引物，利用 术克隆得到FsII的3 II bp的FS 录号为FJl69499。茶树FS 2．利用荧光定量PCR技术分析茶树种质资源中FSII基因的表达情况。首先分析了龙井43新梢、 成熟叶、种子、花蕊和花瓣等五个组织中FSII基因表达，在春梢、成熟叶、花瓣、花蕊、种子中 II基因表达量极显著高于花蕊和 都检测到f∑II的表达。以花蕊为对照，新梢、成熟叶和种子中FS 花瓣，在花瓣和花蕊中的表达量差异不显著。 在7个省份的茶树资源中从云南一广西、福建、广东一浙江或云南一四川一贵州、湖南一江 西、浙江沿着茶树传播方向FsII基因的表达量呈增加的趋势。不同类型的种质资源中，地方品种 和育成品种中的表达量要高于野生茶树。因此，推测届’II的表达量增加，黄酮类化合物的含量增 加，黄酮类化合物具有驱动进化的作用。 基金项目：国家863计划(2006从102171)、浙江省“钱江人才”计划项目(2006R10042)内容之一 作者简介：乔小燕， 研究实习员，主要从事茶树分子生物学研究：陈亮(通讯作者)，博士、研究员，主要从事 L 茶树资源育种与分子生物学．1iangchenQmaitricaas．com，电话 104