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密蒙花提取物滴眼剂对实验性干眼症鼠泪腺组织雄激素
受体数量的影响宰
彭清华，姚小磊，张菁蓉，吴权龙湖南中医药大学(410007)
木：国家自然科学基金面上项目，湖南省自然科学基金资助项目(07JJ3049)
干眼症可导致视力明显下降而影响工作和生活， 其浓度控制0．005％。
虽难以危及生命，但由于其发病率很高，已成为目前 1．3主要试剂
研究的热点问题。雄激素水平下降是干眼症的重要发
病原因，已渐成研究热点。现有治疗方法中，雄激素 品生物制品检定所，含量98．3％计)。
替代疗法是治疗雄激素水平下降所致干眼症唯一的对
因治疗方法，但是长期使用将会带来许多难以避免的 鼠抗人AR多抗(购自武汉博士德生物工程有限公
副作用。现有其他治疗方法均存在着一定的缺陷和局 司)o羊抗鼠FITC—IsG(购自武汉博士德生物工程有
限性。密蒙花为中国药典收载药品，眼科常用中药，
其有效部位为黄酮类物质。雄激素、黄酮类化合物均 分析纯或由分析纯配制而来。
为杂环多酚类化合物，应可以利用其化学结构的相似 1．4主要仪器设备
性，发挥其拟内源性雄激素作用，治疗某些雄激素水 Waters1
平下降导致的眼科疾病，其中可包括雄激素水平下降
所致的干眼症。我们制备密蒙花提取物滴眼剂，以适
用于眼表疾病局部用药的特点；并制作去势大鼠干眼 司)；双光束紫外可见分光光度计(北京普新通用仪器
症模型进行研究，旨在探讨密蒙花提取物滴眼剂对抗 有限责任公司)；流式细胞t贩美国BD公司生产，FACS
雄激素水平下降所致干眼症泪腺组织破坏的作用机制 型)。
以及治疗效果。
2方法
1．材料 2．1密蒙花提取物滴眼剂的制备
1．1实验动物 2．1．1密蒙花有效部位的提取与质控
密蒙花干燥花蕾醇提2次，浓缩后水沉，离心过
取健康一月龄Wistar雄性大鼠45只，体重0．2kg
左右。裂隙灯显微镜、眼底镜检查眼前节及眼底无异 滤，滤液上HPDl00大孔树脂柱，乙醇梯度洗脱，收集
常，0．5％的卡因眼液表面麻醉后SchirmerI试验(SIT)
70％乙醇洗脱液，干燥粉碎即得密蒙花总黄酮提取物。
XGemini mmX4．6
≥10mm／Smin和泪膜破裂时间(BUT)≥lOs检查的动色谱柱：PhenomenexCm柱(250
物方可使用。由湖南中医药大学动物实验室提供。 mm，5斗m)；流动相：甲醇一0．1％磷酸水(55：45，
1．2实验药物 v／v)；流速：0．8mL·min一；检测波长：326
rim；柱
密蒙花干燥花蕾30kg。密蒙花提取物滴眼剂：提 温：30℃；进样量：10恤L。以已经制备的蒙花苷标
取密蒙花有效部位后(具体操作方法见2．1)，以蒸馏 准品溶液作为对照，用外标法计算蒙花苷含量，用已
水溶解密蒙花提取物，水：提取物质量比为1：0．1， 经制备的蒙花苷标准品作为对照，建立紫外标准曲线，
加入眼润滑剂羧甲基纤维素，浓度控制1．5％，加入 紫外法测定密蒙花总黄酮含量。
NaHCO，以及KCI作为缓冲系统，浓度控制在0．1％。
2．1．2密蒙花提取物滴眼剂的制备与相关性质检测
检测理化特性pH值、渗透压、比重和屈光指数，结 以蒸馏水溶解密蒙花提取物，水：提取物质量比
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