青黛炮制工艺的研究.pdfVIP

中华中医药学会中药炮制分会2009年学术研讨会论文集 【9】鲍天冬，董宇，杨庆，等．高效液相色谱法同时测定制吴茱萸及其提取物中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和 吴茱萸内酯含射J】．中国实验方剂学杂志，2007，13(6)：1． 青黛炮制工艺研究 刘泽玉，苏柘僮，高亚男，杨明‘ (成都中医药大学，四川成都610075)5 摘要目的建立一种快速、简便、灵敏、准确的含量测定方法；优化青黛炮制过程中浸泡 环节的工艺，为研究炮制原理提供依据。方法采用HPLC法同时测定靛蓝、靛玉红的含量，按 照相关要求进行方法学研究，比较本方法与《中国药典》2005年版一部收录方法：以供氧方式、 压强、温度等为主要影响因素设计试验对浸泡工艺进行考察。结果方法学考察结果显示各项指 标均符合相关要求；HPLC法测定的靛蓝和靛玉红的含量分别为药典收录方法的1．02倍和1．52 倍。青黛炮制过程中浸泡时，捆绑莘叶造成的厌氧环境显著提高了靛蓝的含量。对靛玉红影响不 大；改变压强，提高了靛蓝的含量，对靛玉红影响不大；通过对20℃～65℃之间的lO个温度段 进行试验，比较得出最佳浸泡温度为35℃浸泡时问12h。结论采用HPLC法测定青黛中靛蓝和 靛玉红含量更简便、快速、准确。在浸泡过程中，改变厌氧方式、温度能明显的影响靛蓝、靛 玉红的含量；而压强对其影响小大，与古人对青黛炮制过程的控制牛H一致，为炮制原理的研究 提供了依据。 关键词青黛：浸泡工艺；靛蓝；靛玉红；HPLC 青黛为爵床科植物马蓝Baphicacanthus tinctonum Ait．或十字花科植物菘蓝Isatis indigoticaFort．的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块【l】。《中国药 典》2005年版川中分别采用紫外分光光度法、薄层扫描法测定青黛中靛蓝和靛玉红【2~3】的含量，其存 在安全系数低，准确度低，相对耗时，不够简便等问题。本实验拟采用HPLC法同时测定青黛中靛蓝 和靛玉红，使得测定过程更简便、迅速，结果更准确、真实，为炮制过程中工艺筛选奠定了基础。 青黛的炮制过程，是马蓝茎叶中的前体物质向靛蓝、靛玉红转化的过程，是由粗；锗分离精制为纯品 的过程。该过程中的基本环节【4~7】主要包括浸泡水解、打靛、水飞精制等，浸泡水解过程中有微生物 作用，在露天环境下进行，必然受到外界环境影响，如供氧方式、压强、温度等多种因素。本实验 以靛蓝、靛玉红的含量为指标，设计试验筛选出了浸泡环节的最佳供氧方式、压强、温度，为炮制 原理的研究奠定了基础。 1仪器与试药 SZ．93型自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。 马兰茎叶(四川江油恒源药业提供)；靛蓝(中国药品生物制品检定所，批号：110716-200509)； 课题来源：‘中国药典》2010版一部标准研究；围家自然科学基金资助项日 通讯作者：杨明(1962一-)，男，四川省成都市人，教授，博士生导师，药学博士，主研究方向：中药新制剂新技术， 电话：028-maih yangmin916@126．conl ．．270．． 炮制工艺 (重蒸水，自制)；微孔滤头(O．2肛m，购买于Millipore公司)；其它试剂均为分析纯。 2方法与结果 2．1HPLC法同时测定靛蓝、靛玉红的含量 2．1．1色谱条件 色谱柱为安捷伦ZORBAX 波长为289nm：流速为1．0 ml·minl；柱温为室温； 2．1．2溶液的制备 供试品溶液的制备：称取粗靛0．059，加入N，N．二甲基甲酰胺lOOml，超声30min，冷却至室温， 过0．2“m微孔滤膜，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：分别精密称取靛蓝、靛玉红标准品4．28mg、1．64mg，分别加入NN．二甲基 100ml容量瓶中，用N’N．二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，过0．2¨m微孔滤头即得。 2．1．3专属性实验 取空白溶剂、靛蓝标准品溶液、靛玉红标准品溶液、供试品溶液进行测定，各主成分峰间完全 分离，各成分和溶剂之间无干扰。 2．1．4标