大豆子叶节再生体系的建立.pdfVIP

第 34卷第 1期 扬州大学学报 (农业与生命科学版) Vo1．34No．1 2013年 3月 JournalofYangzhouUniversity(AgriculturalandLifeScienceEdition) M ar．2013 大豆子叶节再生体系的建立 刘 银，史秀岚，王静磊，刘琪迩，王幼平 (扬州大学 生物科学与技术学院，江苏 扬州 225009) 摘 要 ：以大豆子叶节作为外植体 ，研究不同基因型对丛生芽诱导的影响，筛选出丛生芽诱导率较高的大豆基 因型小粒 豆 (东农 50)。在此基础上 ，以小粒豆 的子叶节为外植体 ，研究种子消毒方法、种子萌发及芽诱导阶段 6一苄氨基腺嘌呤 (6一BA)对丛生芽诱导的影响以及生根阶段吲哚丁酸 (IBA)对生根 的影响。在确定氯气消毒法作为适宜大豆种子消毒的 方法的基础上 ，最终确定萌发培养阶段添加 1．0mg ·L_。6-BA、芽诱导阶段添加 1．67mg ·L_。6-BA、生根培养阶段 添加 1．0mg·L IBA较宜。 关键词 ：大豆 ；子 叶节 ；丛生芽 中图分类号 ：S565．1 文献标志码 ：A 文章编号 ：1671—4652(2013)01—0068—05 Establishmentofregenerationsystem ofsoybeancotyledonarynode LIUYin，SHIXiulan，WANGJinglei，LIUQier，WANGYouping (CollofBiosciandBiotech，YangzhouUniv，Yangzhou225009，China) ABSTRACT：Inordertoestablishacotyledonarynoderegenerationsystem forsoybean，thecotyledonarynodesof5soy— beangenotypeswerechosenasexplants．Xiaolidou (Dongnong50)，asoneofthegenotypes，wasscreenedoutwiththe maximum inductionrateofmultipleshoots．whichwasthenadoptedfortheselectionofsterilizingmethods，6-BA concen— trationson regeneration ofcotyledonary node including germination ofseedlingsand multipleshoots induction，IBA concentrationsonrootregeneration．Theresultsindicatedthatchorinegasseedsterilizationwouldbethebest，andseed— lingsgerminatedinthemedium with1．0mg ·L～ 6-BA weresuitableasexplants．Theoptimalconcentrationof6-BA in multipleshootsinductionmedium was1．67mg ·L_。．TheoptimalconcentrationofIBA inrootregenerationmedium was 1．0mg ·I ． KEY WORDS：Glycinemax (L．)Merr；cotyledonarynode；multipleshoots 大豆 (GlycinemaxL．)是人类主要植物蛋白和植物油的重要来源L1]。随着基因工程技术的发展 ， 利用转基因技术将外源基因导人大豆 ，已成为培育优 良性状大豆品种的重要方法_2刮。建立高效稳定的 再生体系是大豆基 因工程育种 的重要环节。在 已有 的研究报道 中，大豆可 以使用子叶_4]、未成熟子 叶 ]、子叶节 ]、下胚轴n。。等作为外植体 。其 中，子叶节被认为是大豆再生和遗传转化体系中广泛应 用的外植体 u 。 本试验 比较 了5种大豆基因型的丛生芽诱导率 ，在此基础上 以东农 50(小粒豆)为试验材料 ，研究 大豆的种子消毒方法 、种子萌发及芽诱导阶段 6一苄氨基腺嘌呤(6一BA)对丛生芽诱导 的影响以及生根阶 段口BI哚丁酸 (IBA)对生根的影响，以期摸索出一套用于转化研究的高效、稳定的大豆子叶节再生体系。 1 材料与方法 1．1 供试材料和