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北京大学生物基础实验教学中心 典型教学视频案例简介 分子生物学设计实验简介（10001_3_d_1.asf）……………………………2 家免呼吸运动和动脉血压的调节实验简介（10001_3_d_2.asf）…………4 双向电泳实验简介（10001_3_d_3.asf）……………………………………5 分子生物学设计实验简介 分子生物学设计实验是学生选定一个题目，通过资料查询后自主设计一组实验， 其中涵盖了载体构建，基因重组，蛋白质表达，表达产物鉴定及其蛋白质分离纯化 等分子生物学内容。 设计实验的主要步骤：首先用BamH I和Not I两种限制性内切酶的消化把EGFP 基因从pEGFP-N3质粒中克隆出来，或者用PCR方法把EGFP基因从pEGFP-N3质粒中扩增 出来。 并定向插入到表达载体pET-28a质粒的多克隆位点（MCS）中，用此重组质粒 转化大肠杆菌BL21 (DE3)，在IPTG的诱导下表达出带有N端His-Tag的融合蛋白。表 达了GFP的菌体在离心管中呈黄绿色，在紫外光激发下发射出特异的绿色荧光，证明 了目的蛋白的成功表达。另外在菌体总蛋白的SDS电泳图谱中出现了明显的诱 导条带，且条带中蛋白浓度与诱导时间呈正相关。随后的Western Blotting免疫反 应进一步确证此条带代表的蛋白质正是带有His-Tag的融合蛋白。 由学生自主设计一个全新的教学实验流程，改变以前分子生物学各实验之间割 裂无联系的状况，使综合实验更具有自主性、趣味性，更有利于培养学生的科研能 力的培养，包括口头表达能力和写作能力。综合性实验包含了实验室现有的分子生 物学实验技术，各个实验之间紧密相连，每一部分实验结果都会直接影响最后的实 验结果，这样学生都很有责任感。当他们通过每一步的不懈努力，最后观察到预期 的实验成果时，学生们非常有自信和成就感。设计实验不但不会降低教学质量而且 在内容和技术上有很大提高，更加全面地掌握分子生物学实验技术，实验结束时相 当完成小课题，为学生进入科研阶段打下良好基础。 今后根据学生不同的背景，技术掌握程度和经验值不同，可以选取更多种目的 蛋白，由同学选择进行克隆表达，增强实验的探索性和趣味性，从而能够真正模拟 科研进行状况。 家免呼吸运动和动脉血压的调节实验简介 在近年来先后开设的十几个生理学实验中，家免呼吸运动和动脉血压的调节实 验是一个非常有代表性的实验。 每一个实验教师都已重复过几十次、甚至上百次，但在每学期上课之前仍要对 实验的具体内容及过程进行详细的讨论，做好预备实验。 实验课前要求学生认真预习，对实验中难点以及可能出现问题作出判断。 通过学习，不仅能使学生获得良好的解剖学、组织学知识及较强的生理学实验技能， 还能培养学生的团结合作精神。 在学时压缩的大背景下，教师们在进一步凝练实验内容的同时，也注意结合社 会和科学的发展不断补充新的知识。有关“实验动物福利，伦理”的知识及国家或 地方政府的政策法规就是我们近年来补充的内容之一。 “动物生理学实验”是学好生理学不可或缺的课程之一。经过几代教师的研究和经 验积累，北京大学生命科学学院建立了具有自己特色的生理学实验教学模式。 双向电泳实验简介 双向电泳在蛋白质的分析过程中是分辨率最高的一种电泳技术，据文献报道在 同一张双向电泳图谱上能够分辨出多达近10000种蛋白质，是其它任何单向电泳技术 无法比拟的，近年来在蛋白质组学的研究中起着重要的作用。北京大学生命科学学 院于2003年率先在高年级本科生实验课教学中开设双向电泳实验，该实验综合性强， 涉及的实验技术广泛，包括细胞的蛋白质全组分提取、聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电 泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质凝胶电泳显色等实验技术。学生通过该综合 实验的训练，不仅掌握了双向电泳实验设计的基本原理，还培养了综合实验技能， 提高了综合分析问题和解决问题的能力。