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褐藻酸降解菌的筛选及其生长条件.pdf
维普资讯
l0卷 第 l期 中国水产科学
JournalofFisherySciencesofChina VFn1.10 No.1
2003年 2月 eb ., 2003
褐藻酸降解菌的筛选及其生长条件
王艳玲 ,唐学玺,杨 震
(中国海洋大学 海洋生命学院,山东 青岛,266003)
摘 要 :采用安藤芳 明选择性培养基从 自然发病明显的海带幼苗上分离出8株褐藻酸降解菌。研究表明。8株菌能
够不同程度地降解褐藻酸钠 ,菌株 Al和A2表现 出较强的降解能力 ,接种 1d后液体培养基即变清。温度是该菌大
量繁殖的决定性因子 ,其生长的最适温度为 20cc,最适 pH7.5。褐藻酸钠质量分数为 0.5%~0.6%时,不同氮源和
碳源对菌体生长的影响不 同,其中有机氮和铵态氮有利于菌体生长,尿素和硝酸钠抑制菌体生长;只有在培养基中
含有褐藻酸钠时,菌体才能正常生长。
关键词 :褐藻酸降解菌 ;生长条件 ;海带
中图分类号 :$917.1;Q93.3 文献标识码 :A 文章编号:1005—8737(2003)1—051—04
海带 (Laminariajaponica)以其工业价值和药 化 ,至确认为纯菌后移入斜面保存 。
用价值促进 了沿海经济的发展。但是随着养殖规模 1.3 人工感染实验
的不断扩大 ,海带病害时有发生 ,造成 了重大经济损 取健康海带苗 ,置无菌海水中用无菌棉球正反
失u~ 。一些研究指 出,褐藻酸降解菌与海带病烂 面反复擦洗。此操作在 3个无菌培养皿 中依次进行
有密切的关系,褐藻酸降解菌的大量增殖是海带病 后 ,用无菌海水冲洗 ,然后置无菌培养皿 中。实验菌
烂 的重要原 因 J。因此找 出该致病菌异常增殖 的 株斜面培养 24h后进行感染实验 。感染时将海带
原因,并对其生长规律进行研究 ,从根本上对海带病 用无菌刀片轻轻切开 1~2rain,接入一环菌 ,加入无
害加 以预防和 防治是十分必要 的。 菌海水 ,置于室温 10~15℃,在非直射光的 自然条
件下培养,对照组不作处理 。每一菌株重复 3组 。
1 材料与方法
1.4 褐藻酸降解茵降解能力分析
1.1 藻体来源 参照陈脶等J的方法进行。取保存的菌株分别
2000年 1O月从烟台海带养殖场采集病烂严重 接种到装有 已灭菌的褐藻酸钠液体 培养基的试管
的海带幼苗,藻体长 5~7cm。同时取长度一致的健 中,接种 的初始密度均为 3X106/mL,接种后于 20
康藻体作为对照。 ℃培养观察 ,通过培养基澄清的时间长短来判断它
1.2 病原茵的分离 们的降解能力 ,筛选 出高降解能力的菌株 。
1.2.1 分离纯化培养基 采用安藤芳明£63选择性 1.5 褐藻酸降解菌生长条件实验
培养基 。配方如下 :(NH4)2SO4 5g,K2HPO40.2g, 1.5.1 生长基础培养基 在分离纯化培养基中添
FeSO471-I200.01g,NaC125g,褐 藻酸钠 5g,琼脂 加海带浸 出液 (1g干海带于 100mL 自来水 中煮沸
15g,自来水 1000InL,pH7.4。 10min,上清液 即海带浸出液)2mL。
1.2.2 分离纯化 自海区取 回病藻,先用过滤海水 1.5.2 液体菌种培养 接一环菌种 A1于装有 20
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