茚三酮比色法测定茶叶中氨基酸含量.pdfVIP

周国兰 ,等 :茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量方法存在问题的探讨 79 茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量 方法存在问题的探讨 周国兰 　何 　萍 　郑文莉 (贵州省茶叶研究所 ,湄潭 　564 100) 　　氨基酸是茶叶中的主要成分 ,茶叶中氨基酸与 2　使用国家标准方法时存在的问题 茶叶嫩度有密切关系 ,它对茶汤的滋味、色泽也有较 2. 1　不同实验室采用同一方法测定结果存在很大 明显的影响 ,是形成茶叶香气和鲜爽度的重要成分 。 差异 茶叶中有 20 多种游离氨基酸 ,其中茶氨酸占氨基酸 　　表 1为不同实验室采用 GB / T 83 14 方法测定的 总量的 50%以上 。 结果 。 　　目前 , 国家标准规定测定茶游离氨基酸总量采 表 1　不同实验室采用标准方法对茶样的分析结果 用 GB / T 83 14 《茶 　游离氨酸总量测定 》, 即茚三酮 样品编号 游离氨基酸总量测定结果 / % 相对误差 实验室 1 实验室 2 / % 比色法 。由于该标准存在较多问题 ,导致各分析室 1 13. 8 7. 8 80 对同一样品的测定结果有很大差异 ,为此笔者查找 2 9. 5 4. 8 100 相关文献资料 ,咨询同行专家 ,对该标准中的疑点进 3 9. 0 5. 0 90 4 8. 4 4. 5 90 行了反复的试验研究 ,并对疑点进行了修正 , 旨在使 5 9. 2 5. 3 70 各分析室测定数据可比性强 ,达到方法统一 、数据一 　 注 :相对误差以实验室 2 的测定结果为参比。 致的目的。 2. 2　没有严格执行国家标准 1　GB / T 83 14 标准的引用 　　因市场上很难购买到茶氨酸纯品 , 只能用谷氨 1. 1　游离氨基酸定义 酸代替 。按照标准 曾先后多次做过谷氨酸标准 曲 　　游离氨基酸 :茶叶水浸出物中呈游离状态存在 线 ,但都以标准曲线无梯度而无法对应计算样品的 的 α- 氨基的有机酸 。 结果而告终 。因此人们长期以来习惯用公式 :游离 1. 2　测定原理 ( ) 氨基酸总量 % = 7. 5EM m 来计算结果 ,其中 , E α 　　 氨基酸在 pH 8. 0 的条件下与茚三酮共热 ,形 为样品测定的吸光度 ;M 为试样量 ; m 为试样干物 成紫色络合物 ,用分光光度计在特定的波长下测定 率 % 。于是形成了样品测定采用的是国家标准步 其