LCM和TMAs技术在肿瘤分子病理学研究中的意义和应用.pdfVIP

维普资讯 实用癌症杂志2002午9月第 l7 5期 ThePractica1JournalofCancer，September2002,Vol1王 · 555 · LCM 和 TMAs技术在肿瘤分子病理学研 究 中的意义和应用 滕梁红综述 吕 宁 赵晓航审校 关键词 ：激光捕获显微切割技术 ；组织微阵列技术；病理 外激光束，直接对准靶细胞 (群)。由于EVA材料可以吸收与 中图分类号：R730．2 文献标识码：B 红外激光相似波长的光波，所以当红外激光通过EVA膜时，后 文章编号：1001—5930(2002)05—0555—03 者因吸收其大部分能量而升温融化，并渗透到靶细胞周围，迅速 冷却后与 l～5个靶细胞固化为一体 ，从而将靶细胞 自切片组织 整个人类基因组序列的破译提供了人类基因最基本的结构 面转移至EVA膜上。收取 EVA膜便可以收集到所需要的靶 信息，同时一些功能性基 因组技术的出现 ，如cDNA微阵列技 细胞 (群)。 术，蛋 白质组学技术的产生，使人们可以同时观察多个基因的表 1．2 LCM 在肿瘤研究中的应用及前景 达信息。但是，目前深人了解肿瘤的发生发展过程，还面临着许 由于 LCM 获取组织细胞准确，迅速 ，方便易行 ，在分子生 多困难，如在同时观察大量组织标本中的基因表达情况，即高通 物学领域中与其它技术联合应用可以使实验结果具有更强的客 量的基因原位表达信息，以及如何降低肿瘤组织的异质性 问题 观性 ，可比性和可重复性。目前 LCM 技术已被广泛应用于多 等方面，仍然存在不少问题。为了解决这些难题，许多新的技术 种肿瘤的分子病理学研究，如乳腺癌 [1·2l、口腔癌 3、食管癌l、 应运而生。目前在肿瘤分子病理学 中最为重要的新技术应用当 卵巢癌_55|、结肠癌E6J和前列腺癌E7,8J等。 属激光捕获显微切割技术 (1asercapturemicrodissection，LCM) 1．2．1 肿瘤细胞的遗传分析研究 经过 LCM获得的细胞群 和组织微阵列技术 (tissuemicroarrays，TMAs)。 可以用来进行各种遗传分析。Roth等 J人在研究食管鳞状细 胞癌的多条染色体上共 l2个微卫星位点的杂合性缺失(1ossof l 激光捕获显微切割技术 heterozygosity，LOH)频率时，使用 LCM技术选择性地切割分 离出了具有不同程度形态学异型性的鳞状上皮细胞用于研究。 LCM 技术是 1996年首先由美国国立卫生研究院(national 结果显示在肿瘤发生的3个不同阶段(轻度不典型增生、高度不 instituteofhealth，NIH)LanceA．Liotta实验室的Michael和 典型增生和癌)中均存在LOH，而且其缺失频率随着疾病严重 Emmert—Buck等…科学家提出的，它解决了组织标本中的细胞 性的增加而增高，提示食管鳞癌的发生伴随着高度的遗传不稳 异质性问题。众所周知，肿瘤组织的构成是非常复杂的，其中除 定性 ，而且这种不稳定性可能在很早的癌前病变中就 已存在。 了肿瘤细胞外，还包括大量的间质成分。这些间质成分的不同 Takeshima等L5J人应用LCM 技术研究 了卵巢黏液性肿瘤 中的 和数量的差异在很大程度上干扰着取材于肿瘤组织的DNA、 LOH和基因突变情况，其中2例是混合性上皮肿瘤 ，即黏液性 RNA或者蛋白质水平上的研究工作。如何得到组织学上高纯 囊腺瘤和Brenner瘤并存的病例。Brenner瘤的生长方式通常 度单一类型细胞 (群)，成为分子病理学研究 中的重要课题。虽 为肿瘤性上皮细胞呈巢状排列在大量 的非上皮性间质 中，以往 然体外细胞培养技术可以部分达到组织学纯化的 目的，但却不 的技术均不能得到纯化的肿瘤细胞。应用 LCM 技术 ，Takeshi— 能直接反映肿瘤细胞在体