鸡新城疫-减蛋综合征-传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗地研究.pdfVIP

生曼董墼璺匿芏盒曼星芏堂皇蔓±壅兰苤堡过盒垂塞塞 鸡新城疫一减蛋综合征一传染性法氏囊病三联 油乳剂灭活疫苗的研究 马增军 陈翠珍沈萍 芮 萍房 海 史秩梅王廷富 (河北职业技术师范学院动物科学系，066600) 李建国 (河北省畜牧局，050011) 摘要用ND 等含毒组织，结台JD2囊组织毒．制备各种病毒抗原浪．经福尔马林灭活后接一定比例混台，再加入台硒免疫增强 荆，与自油佐荆乳化成油包水型三联乳荆疫苗。对三联苗各项技术指标进行了测定，证明本疫苗安全、无剐作用，接 种后2～3周产生免疫保护．ND和EDsf6攻毒保护率为loo“。通过免疫抗体检测．滚三联苗均船产生较高教竹的 后B周测定其1日龄雏鸡IBDAGP抗体阳性率为96．35％。f奉疫苗在河北省一些种璃场和蛋鸡场应用，均获得满 意效果，有效控翩了ND、EDs76及IBD的发生与流行J i关t调多联疫苗ND、EDs76、IBD免疫原‘ ／』 ’ 鸡新城疫(ND)、减蛋综台征(EDs76)和传染性法刮囊病(1BD)是目前危害养鸡业的主要病毒性传染病．鸡新 城疫对幼龄鸡和成年鸡均危害较太}传染性法氏囊病主要感染幼蚺鸡}减蛋综合征造成产蛋鸡减蛋。对上述三种疫 病的瑗防．目前仍主要采取疫苗接种的方法。]。为有效控制此三种痤病的的发生。在成鸡常需要同时期内进行接 种，为碱化免疫程序，提高免疫效果．进行了NmEDs76一mD三联油乳剂灭活疫苗的研究，取得了可行性的效果。 1材料与方法 1．1制苗用毒株新城疫LaS0ta株、减蛋综合征毒株和传染性法氏囊D78株为引进毒种}传染 性法氏囊病强毒株JD2为本课题组分离获得口1。 1．2鸡胚、鸭胚及试验鸡由非免疫蛋自行孵化至所需胚龄或隔离饲养至所需日龄。 1．3试剂自油(杭州炼油厂)，硬酯酸铝、司本一80和吐温一80(上海大众)。免疫增强荆，本课题 组配制。I肋、EDs76、ND抗原及其标准阴、阳性血清均引自中国兽药监察所。 1．4抗原制备 ND LaSota株弱毒，通过鸡胚增殖收集尿囊液；EDs76病毒通过鸭胚增殖，收集尿囊液。以上 两种病毒均采用血凝试验检测其病毒效价。IBDJD2株本动物囊组织扩繁和鸡胚增殖，D78株通过 鸡胚增殖。收集囊组织、绒毛尿囊膜、尿囊液及胚体制成抗原。 1．5疫苗配制 取以上各病毒液按常规用甲醛灭活后，以一定比例混合，加入免疫增强剂，作为制备三联油乳 剂疫苗的水相，与上述佐剂及乳化剂，按一定比倒进行乳化，制备成油包水型乳剂疫苗““]。 1．6无菌检验按常规标准对研制的三联苗进行无菌检验“3。 1．7物理性状检查制备的三联苗为乳白色油包水型乳剂；3000rpm离心15min不分层，粘度平 均为8s／o．4m1。长期静置会在瓶底出现一薄层囊组织颗粒沉淀。 1．8疫苗的安全检验 选无母源抗体的鸡20只，其中10只鸡每羽注2ml该三联苗，观察有无明显毒副作用，和对生 一36— 主垦董墼璺匡呈塞查堑芏坌皇蔓土壅呈苤曼世量垂塞基 产率及肉品品质的影响”1；另10只鸡作为对照，注射PBs液2m1均观察2周，并剖杀部分鸡只，取 囊作病理组织学观察”J。 1．9效力检验 I．9．1免疫抗体测定 根据不同抗原含量和配合比例配制了A、B和c三组疫苗，A和B为抗原量不同的三联油乳剂 随机分为三组，试验各组每只鸡颈部皮下接种相应的疫苗o．5ml，饲养方式为笼养，组间隔离。每隔 两周，翅静脉采血一次(每次各组均随机抽取10只鸡)，分离血清。 (AGP)法，当各组血清效价均呈现下降时，停止监测。对各组数据取几何平均值(G)．然后绘出曲线 并进行差异显著性比较。 1．，．2三联苗免疫雏鸡攻毒保护试验 用所研制的三联苗，选30日龄敏感鸡15只，每只颈部皮下注射o．5fIll，免疫后21天，各取5 一周。观察鸡只发病及死亡情况。以无典型病变或死亡为保护标准。 1．10保存期测定 取该三联苗分别放于室温和4℃冰箱保存lo个月，观察并检测免疫鸡的效果与近期疫苗做比 较。取35日龄未免疫雏鸡，经血清效价测定为阴性者，进行免疫试验并在21天采血，分离血清测定