PCV2疫苗接种鉴别ELISA方法深入研究.pdfVIP

21届国际猪兽医协会大会论文集加拿大温哥华2010年7月18．21日 PCV2疫苗接种鉴别EuSA方法的深入研究 Sheela Rammoorthy(美国) 序言 之前的研究工作表明针对PCV2鉴别ELISA法可以用于检测由疫苗接种产生的特异性抗体。该检测方 Intervet Animal ScheringPlough Health)疫苗后3—4周猪只的血清抗体。但在某些情况，一些非免疫 猪只在育肥阶段也可以针对野生型抗原(杆状病毒)产生抗体。我们假设这些非特异抗体是由于具有交叉 反应性的昆虫细胞抗原引起的。我们的研究目的是确定在引起免疫猪只免疫反应的成分，是否针对SF9昆 虫细胞交叉反应性抗原可以有助于提高检测的特异性。 材料及方法 实验所使用血清样品来自之前针对研制不同ELISA检测方法的临床和实验室研究，每个血清样品用分 别包被有圆环病毒ORF2蛋白、野生型杆状病毒和SF9昆虫细胞的抗原孔进行检测，每个样品两个重复。在 对于ELIsA，每个板子有包括来自接种和未接种的CDCD猪血清样的合适的对照。杆状病毒抗原孔光密度净 值的计算为由野生型杆状病毒孔减去SF9细胞孔所得。数据结果以组平均光密度值表示。阳性和阴性阻断 率对于野生型抗原和杆状病毒分别计算值为0．300和0．100。 结果 表1显示的是来自三个独立实验做出的野生型圆环病毒、SF9细胞和杆状病毒作为包被抗原检测结果。 采集血样的时间分别为接种前和二次接种后3周。表2显示的是用杆状病毒作为包被抗原检测来自两个临 床研究采集猪只血样中的抗体，这些猪都是直到达上市体重时定期进行采血。A猪群在15周龄和21周龄 检测体内杆状病毒背景抗体，B猪群在14和25周龄检测该抗体。杆状病毒抗体和阳性动物比 例很相似。 表1三组实验组实验结果 野生型0RF2 SF9细胞 昆虫杆状病毒 实验组／时期 光密度值 阳性率 光密度值 光密度值 阳性率 接种组／接种前 O．155 1／18 0．164 O．009 0／18 接种组／接种后 O．616 35／41 O．245 0．37l 38／41 对照组／接种前 O．132 0／17 O．13l O．001 0／17 对照组／接种后 0．224 5／23 0．199 0．026 l／23 417 2l届国际猪兽医协会大会论文集加拿大温哥华20lO年7月18．21日 表2两个猪群实验期内昆虫杆状病毒滴度 周龄 A猪群 B猪群 实验组 周 光密度值 阳性率 光密度值 阳性率 接种 3 0．011 O／16 一O．002 O／32 接种 6 0．120 12／16 O．057 3／32 接种 9 O．512 32／32 O．383 31／32 接种 15／14 0．157 9／16 0．235 27／32 接种 21／25 0．200 12／16 0．147 15／30 对照 3 0．001 0／16 O．000 0／6 对照 6 0．016 O／16 O．01l 0／6 对照