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农业生物技术学报 !#$%’()(*+$,-#’.#$’(/,.0-1%’+2(((((:7;((((57=58 ( ) 研究论文 利用R?D 干扰技术抑制水稻淀粉极限糊精酶基因表达 763( 3( O 7 (3 3 3 !# 6($% 6(’() (6(* + (6((T’0J,%+(! 6(((U$0’’(U 6((R1J%(S ( : 7@( V( B84443 3@(W’%. X%G#E.$2 6 YJJ%M0’.1 河南省农业科学院生物技术研究所 河南省农作物新品种重点实验室 郑州 ’ Z[\]^_‘abc def ghijklmnop qrstuvwx yz{|}~ Yde0vvd DY 3C4 76 Djklvd’bd O@ 573 744(; ’ 西北农林科技大学农学院 杨凌 ,-! R?Db 构建了含极限糊精酶基因片段反向重复结构的 载体 抑制水稻籽粒中极限糊精酶基因表达获得了极限糊精 酶基因功能缺失突变体% 经酶切及序列测定证实 成功地构建了胚乳特异表达启动子启动的水稻极限糊精酶基因反向重复结 构R?Db 载体 通过根癌农杆菌:D{vdcl0vbjJ ljJ0adcb0ek;介导水稻:yv2d kdlbd(kF@(L dFebcd;转化 经WYR 及 S#lx0ve 杂交检 ’ 3A 0kl0ve 测 获得 个水稻转基因再生株系 以极限糊精酶抗体对转基因株系胚乳发育期籽粒蛋白质进行 杂交 并经 ’ SZIWDH 极限糊精酶活性检测结果显示该反向重复结构在胚乳发育期表达减少了极限糊精酶的积累获得了不同沉默 473 74 效果的转基因株系% 转化株系 的极限糊精酶活性只有野生型的 表明该载体可有效地抑制水

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