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高电压技术 第 38卷 第 12期 2012年 12月 31日 HighVoltageEngineering，Vo1．38，No．12，December31，2012 3381 高强度皮秒脉冲电场诱导 HeLa细胞生物 电效应分析 郭 飞 ，姚陈果 ，章锡明 ，孙才新 ，张 玉 ，熊正爱。 (1．重庆大学输配 电装备及系统安全与新技术 国家重点实验室，重庆400030； 2．重庆医科大学附属第二医院，重庆 40001O) 摘 要：为研究高强度 ps脉冲 电场 (psPEF)诱导HeLa细胞的生物 电效应 ，将脉冲电场参数组合(电场强度为 250 kV／cm，脉宽为 800ps，脉冲个数为 1000、3000、5000，频率为 3Hz)作用于人宫颈癌 HeLa细胞 。利用噻唑蓝 (methylthiazolyltetrazolium，MTT)比色法检测 ps脉冲对细胞的生长抑制情况 ；钙离子指示剂 (Fluo一3／AM)探针 标记细胞 ，激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子体积分数 的改变 ；蛋 白质印迹法检测促凋亡蛋 白Bax与凋亡抑制 蛋 白Bcl一2释放水平的改变。实验发现：细胞死亡率与施加脉冲个数正相关，且处理后 12h抑制率最高；激光扫描 共聚焦半定量分析显示，处理组细胞荧光强度明显高于对照组 (检验水准P0．05)；蛋 白质印迹法检测结果表明， 处理组细胞 内Bax表达量增加 (PO．05)，Bcl一2释放量略有降低。上述结果表明：高强度 ps脉冲通过诱导细胞凋 亡进而抑制 了HeLa细胞 的增殖。 关键词 ：ps脉冲电场 (psPEF)；HeLa细胞 ；生物 电效应 ；噻唑蓝 (MTT)；激光共聚焦显微镜 ；细胞凋亡 DoI：10．3969／j．issn．1003—652O．2O12．12．042 文章编号 ：1003—6520(2012)12—3381—06 EffectsofIntensePicosecondPulsedElectricFieldon HeLaCells GUO Fei，YAO Chenguo ，ZHANG Ximing ，SUN Caixin ，ZHANG Yu。，XIONG Zheng’ai (1．StateKeyLaboratoryofPowerTransmissionEquipment System SecurityandNew Technology． Chongqing400030，China；2．SecondAffiliatedHospital，ChongqingM edicalUniversity， Chongqing400010，China) Abstract：InordertOstudytheeffectsofintensepicosecondpulsedelectricfield(psPEF)onHeLacells，thepsPEF withcertainparameters(fieldintensityof250kV／cm，pulsedurationof800ps，pulsenumberof1000，3000， 5000；repetitionfrequencyof3Hz)wasinvestigaedonHeLacells．Cellgrowthinhibitionwastestedbymethyl thiazolyltetrazolium (MTT)，changesofconcentrationofCa incellswasexaminedbylaserconfocalmicroscopy withcellstabbedwithFluo一3／AM，andreleaselevelsofBaxandBcl一2weredetectedbyWesternblot．Experimental resultsindicatethatcelldeathisinpositivecorrelationwithpulsenumber，reachingitsmaximum celldeathat12h aftertreatment；significant