心肌靶向脂质体的制备和体外靶向性研究.pdfVIP

的限制或检测灵敏度的限制造成的，也可能是UGTlA3—3对槲皮素的催化存在区域选择性，只能催 化一个葡糖醛酸缀合物的形成。 本实验获得了在cHL细胞中表达的人UGTlA3蛋白，其活性通过槲皮素的葡糖醛酸缀合反应确 定。本研究所作的工作将为药物代谢和疾病机理等相关研究提供基础。 心肌靶向脂质体的制备及体外靶向性研究 邓英杰 郝艳丽，王秀敏(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016) 摘要：目的制各PAC修饰的脂质体，并对其体外心肌细胞靶向性进行研究。方法选用与B。一受体 阻滞剂艾司洛尔结构类似的亲脂性化合物PAC修饰脂质体(PAc—L)；将荧光标记的脂质体加入到体外 培养的心肌细胞中，分别在常氧及缺氧条件下共同培养一定时间后，用荧光分光光度计测定心肌细胞 摄取荧光脂质体的量。结果体外心肌靶向性研究表明PAC．L与心肌细胞有较强的亲和力，在常氧状 关键词：脂质体：心肌细胞；靶向性 脂质体是近年来国内外研究较多的一类药物传递系统(DDS)，作为药物载体其主要优势之一是能 电及中性脂质体能够在缺血心肌组织中累积以来，大量研究“。3表明脂质体可以靶向分布到缺血的心 肌组织及缺血的心肌细胞中，从而提高心血管药物的疗效。选择性B．一肾上腺素受体(B。一AR)在人体 内主要分布在心脏，在肝、脾、肺等器官极少分布。研究表明，心肌缺血时心肌细胞膜上B。一AR数 量显著增加，细胞内部的B-一AR不断向细胞膜表面转移，且B，一AR的敏感性显著增强，而此时8。一AR 的数量并不上调”。。 为了增加脂质体的心肌靶向性，本文采用与选择性Bt一受体阻滞剂艾司洛尔结构类似的亲脂性化 并对其体外心肌细胞靶向性进行了考察。 1仪器与材料 二氧化碳细胞培养箱(REV 州净化设备有限公司)：电热恒温水浴(大连医疗器械厂)；6孔细胞培养板和无菌塑料旋盖刻度离心 440SX NICOMP一380／ZLS激光粒度测定仪(NicompCo．)；DelsaZeta电位测定仪(BeckmanCo．)。 IMDM培养液(Invitrogon Polar Lipids． Chemical Inc)；BCA蛋白测定试剂盒(Pierce Co．)。其他试齐j均为分析纯。 新生1’2天昆明种小鼠(长春生物制品研究所实验动物中心提供)。 2方法 ．36． 2．1 PAC修饰脂质体(PAC—L)的制备 和PAC-L的处方(moiar u 记脂质体溶液反复挤出过0．22m微孔滤膜5次，以匀化粒径。 2．2心肌细胞的原代培养 在文献“报道的心肌细胞原代培养方法基础上进行改良。取刚出生l’2天的昆明种小鼠，皮肤消 毒后，开胸取。II脏。用预冷的D-Hank’S液于平皿中洗净血污，在少量消化液中剪成1 film3左右的均 匀碎块并转移到无菌塑料旋盖刻度离心试管中。加入0．12％II型粗制胶原酶，37。C恒温水浴中振摇状 态下分次消化，6-8 min／次。自然沉降收集除第一次以外的细胞悬液离心洗净消化酶后加适量IMDM 培养液制成细胞悬液，按差速贴壁分离法预接种于细胞瓶中，90min后将未贴壁细胞吸出，经200 mmol 目无菌不透钢网过滤，滤液稀释至5X105个细胞／mL，并加入0．1 L。1的5一溴脱氧核苷。将上 述细胞悬液接种于6孔细胞培养板，2 条件下培养，24h时细胞贴壁并开始出现节律性搏动，培养72～84 h的细胞可