染矽尘大鼠早期单核细胞趋化因子-1与巨噬细胞炎性蛋白-1α变化规律研究.pdfVIP

中国职业安全健康协会 2013 年学术年会论文集 染矽尘大鼠早期单核细胞趋化因子-1 和 巨噬细胞炎性蛋白-1α变化规律研究 周效宝 张玮 2 王瑞 2 刘红军 2 曲佳2 （1. 山东省安康医院，山东 济宁 272051 ； 2. 山东省职业卫生与职业病防治研究院，山东 济南 250062 ） 【摘 要】目的 探讨染尘大鼠早期单核细胞趋化因子-1 （MCP-1 ）和巨噬细胞炎性蛋白-1α （MIP-1α ）的变化规律与炎性细胞及矽肺的关系。方法 168 只 Wistar 大鼠随机分为对照组、低、 中、高剂量组，每组42 只，染尘剂量分别为 15、30、60 mg/ml 。一次性气管内注入染尘建立大鼠 矽肺模型，每组分 6 个时间点(第 1 , 3 , 7 ,14 , 21 , 28 天) 分别取 7 只大鼠处死，收集支气管肺泡 灌洗液，采用 ELISA 试剂盒测定 MCP-1 、 MIP-1α浓度。结果 不同染尘剂量间 MCP-1 、 MIP-1α 差异均有统计学意义（P0.01 ）。在各时间点剂量组与对照组相比较，2 种因子的浓度均有不同程 度的升高，差异有统计学意义（P0.05 ）。总体观察染尘第28 天显示，MCP-1 浓度在早期高于后期， MIP-1α在第 14 天出现高峰，并且 MIP-1α与 MCP-1 、TNF-α、IL-1 、 IL-6 、TGF-β均呈正相关（P0.01 ）。 BALF 中巨噬细胞和中性粒细胞与 MCP-1 均呈正相关（P0.05 ）。结论 大鼠肺组织炎性细胞和细 胞因子的改变与 MCP-1 和 MIP-1α趋化因子的改变趋势一致，推断在 2 种趋化因子的作用下，肺组 织炎性细胞和细胞因子发生相应改变。MCP-1 和 MIP-1α作为矽肺早期检测生物标志物具有可行性。 【关键词】矽肺；趋化因子；炎性细胞；炎性因子；肺纤维化；矽尘 【基金项目】国家自然基金）；山东省科技攻关项目（2008G）。 [中文分类号] R135.2 [文献标志码] A [文章编号] 矽肺是由于长期吸入大量游离二氧化硅引起的以肺组织弥漫性纤维化为主的全身疾病，目前尚 无法用单一的机制来解释其形成过程，但在矽肺发生发展形成的整个进程中，趋化因子参与了免疫 细胞向病灶部位的侵润[1~2] 。可见趋化因子在病灶出现较强烈的炎症反应前便已存在，因此对肺内 某些趋化因子含量的观察对预防矽肺的发生具有重要意义。我们拟通过不同剂量染矽尘大鼠建立矽 肺模型，研究支气管肺泡灌洗液（BALF ）中单核细胞趋化因子-1 （MCP-1 ）和巨噬细胞炎性蛋白 -1α （MIP-1α ）变化规律与炎性细胞及矽肺的关系，为矽肺的早期预防提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物及分组 选择清洁级 Wistar 大鼠 168 只（山东大学实验动物中心，许可证号： 712 中国职业安全健康协会 2013 年学术年会论文集 SCXK （鲁）2009-0001 ），雄性，体重 160~180g，适应环境 1 周，随机分为 4 组，每组 42 只。对 照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组染尘剂量分别为 0、15、30、60 mg/ml 。 1.1.2 主要仪器及试剂 SiO2 粉尘 （美国Sigma 公司）、ELISA 试剂盒 （美国BLOWEN 公司）、 青霉素钠（山东鲁抗辰欣药业有限公司）、HXS-3C 酶标仪(杭州博特仪器设备有限公司) 、IEC Micromax 冷冻离心机（美国 Thermo 公司）、光学显微镜（日本奥林巴斯公司）。 1.2 方法 1.2.1 大鼠分组和染尘 采用 1 次性气管内注入染矽尘法建立大鼠矽肺模型，大鼠乙醚麻醉 后，平放在操作台上，用镊子提起舌头，把耳镜慢慢从口插入