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真核细胞中总RNA的制备.pdf
安徽医科大学学报 A cta Un iv er sitatis M ed ic inalis A nhui 2004 Apr; 39( 2) 163 真核细胞中总RNA 的制备 1 1 1 1 1 1 1 2 ; ; RNA Nor hern cDNA R394- 33 Oligo( dT ) mR NA A 1000 1492( 2004) 02 0163 0 3 , T RIzol RNA RNA GIBCO- BR L , cDNA , , RNA 10 pg Nor hern cDNA R NA , 80% ~ 85% rR NA ( 28 S18 S Oligo( dT ) mRNA T RIzol 5 S 3 ) ; 10 % ~ 15% R NA RNA , RNA ; 1% ~ 5% mRNA[ 1] mR NA , , , , mRNA 3 ( poly A) , 1 [ oligo( dT ) ] , mRNA 1. 1 T RIzol ( GIBCO- BRL ) ; ( ) ; ( RNA , ) ; 75% ( DEPC ) ; R N ase ; 01% ( DEPC) : 200 ml [ 2] 02 ml DEP C , , ; 5 T RIzol : 206 g 3- ( MOPS) 800 R NA ml DEPC 50 mmol/ L , 2 T RIzol mol/ L pH 70 , 10 ml RNA, R N ase DEP C 05 mol/ L DET A ( pH 80) , - N- DEPC 1 L , , RNA , 022 m , ; 1% , RNA : 02 g , DEPC , RNA DNA 126 m l , 5 4 ml, , , 37% 34 ml, , ( ) R NA , DNA , 1. 2 4 ( , : T GL- 16H ) SK- 1 2003 12 10 ( ) 754 : ( : ( : UV- 754) ( : 0 10437 16 1. 3 ) ( : JY XM 2003129) 1. 3. 1 试剂及器皿材料RNA 酶的灭活 : 1 , 160 ~ 180 6h , , 230032 01% ( DEPC) [ 3]
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