大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定.docVIP

青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题 目： 大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定 姓 名： 学 院： 动物科技学院 班 级： 马业科学1201班 学 号： 2012 任课教师： 温建新 二0一四 年 四 月 一 日 大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定 马业科学1201 任课教师 温建新 摘要：为了鉴别大肠杆菌和沙门氏菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。 关键词：大肠杆菌 沙门氏菌 三糖铁 糖发酵 麦康凯琼脂 引言：大肠杆菌是肠杆菌中埃希氏菌中的代表种。根据O、H、K抗原的不同，可将大肠杆菌株分为不同的血清型。自然界中大肠杆菌的血清型可分为数万种，但致病性大肠杆菌的数量有限。 沙门氏菌属是有一大群血清学相关的革兰氏阴性、兼性厌氧的无芽孢杆菌组成，系肠杆菌科中重要的病原菌属之一，对任何动物均有致病性，可以欺人的伤寒、副伤寒、肠炎和食物中毒，对动物能致多种临床表现的沙门氏菌病，亦能以继发菌出现在其他疾病中。 大肠杆菌和沙门氏菌作为肠杆菌科的成员具有一些共同的特征，如形态、染色特性等。但一些培养特性和生化特性有差异，可作为鉴别诊断的依据，有时还需要依靠血清学方法。 目 录摘 要 I 关键词 I 引言 I 1 材料 1 1.1 菌种 1 1.2 培养基 1 1.3 生化试剂 1 1.4 沙门氏菌诊断血清 1 1.5 器材 1 2 方法 1 2.1 增菌培养 1 2.2 直接分离培养 1 2.3 形态观察 1 2.4 培养特性观察 1 2.5 生化试验 2 2.5.1糖发酵管接种 2 2.5.2 蛋白胨水接种 2 2.5.3 葡萄糖蛋白胨水接种 2 2.5.4 尿素琼脂接种 2 2.5.5 枸橼酸盐琼脂接种 2 2.6 生化特性的观察 2 2.6.1 糖发酵实验 2 2.6.2 MR实验 2 2.6.3 VP实验 2 2.6.4 吲哚实验 3 2.6.5 枸橼酸盐利用实验 3 2.6.6硫化氢实验 3 2.7 药物敏感试验-扩散法 3 3 结果观察 3 3.1 大肠杆菌和沙门氏菌在三糖铁琼脂培养基上的生长状况 3 3.2 细菌的染色、镜检 4 3.3 生化管的接种培养 4 3.4 吲哚、MR、V-P实验 5 3.5 药物敏感试验 6 4 结论 7 参考文献 7 1 材料 1.1菌种 大肠杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌与沙门氏菌的混合菌液 1.2 培养基 普通培养基: 肉汤、普通琼脂、半固体培养基。 鉴别培养基：SS琼脂、麦康凯琼脂、三糖铁琼脂。 生化鉴别基：糖发酵管、蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水、尿素琼脂、醋酸铅琼脂。 1.3 生化试剂 MR试剂、VP试剂、吲哚试剂、乙醚、硝酸盐还原试剂等。 1.4 沙门氏菌诊断血清 A~E群多价O血清及单因子血清。 1.5 器材 革兰氏染液、显微镜、吸管等。 2 方法 2.1 增菌培养 用无菌刻度吸管吸取大肠杆菌与沙门氏菌的混合菌液2ml，分别加入已有亚砷酸盐量绿增菌液100ml的试管和四磺酸钠增菌液10ml的试管个1ml.接种后轻轻混匀，置37摄氏度温箱内培养18-24h。 2.2 直接分离培养 2.3 形态观察 以无菌接种环分别挑取麦康凯琼脂平板或SS琼脂平板上新鲜培养的大肠杆菌和沙门氏菌单个菌落，在在载玻片上制成涂片，待自然干燥后，以火焰固定，进行革兰氏染色，镜检。观察两种细菌的形态，大小与排列方式并做比较。这两种都是革兰氏阴性、两端钝圆的球杆菌，菌体大多单个存在，大小差异不显著。 2.4 培养特性观察