研究生课件第三章 PCR技术.pdfVIP

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2017-08-22 发布于河南
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研究生课件第三章 PCR技术.pdf

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School of Biological Sciences 研究生课程——植物生物技术第三章 PCR 技术 PCR=Polymerase Chain Reaction =聚合酶链式反应 School of Biological Sciences 发明人 Kary Mullis，获得Nobel Prize Kary Mullis invented it in the late 1980s and won a Nobel Prize of Chemistry in 1993 第一节 PCR原理与过程 PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外(In Vitro) 的大量合成。它是利用 DNA聚合酶进行专一性的复制,是目前最常用的分子生物学技术,可以将一段基因复制一百亿至一千亿倍。过程: 下面3个步骤的重复(20-40次) 先在94-95℃变性5min 1.变性:94-95℃/40s-1mim 2.复性:40-70℃/40s-1mim 3.延伸:72℃(1kb/1min) PCR Amplifies a Targeted Sequence Target Sequence DNA Strand Double Helix DNA Strand Supercoiled DNA Strand Virus Polymerase Chain Reaction - PCR DNA PCR Many molecules (single molecule) amplification PCR Cycle - Step 1 - Denaturation Template DNA by Heat (95oC) 模板DNA变性 Target Sequence Target Sequence t e 合 g r a t 结 o t 异 ’ l ’ 5 a 3 特 e ’ A n 5 n a N

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