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抗T细胞 实验器材： 剪刀；镊子；注射器；塑料放血管；离心机；动物固定架；灭菌三角瓶；人的胸腺T细胞；离心管；紫外—可见分光光度计；100ml容量瓶；电子称。 实验试剂： 消毒酒精及碘酒；灭菌生理盐水；福氏佐剂；辣根过氧化酶。 实验动物： 体重为2～2.5kg的健康家兔，性别为雄，兔龄为15个月，应符合普通级实验动物的要求。 实验设计的依据： 　 　机体具有识别“自己”和“非己”的功能，当外来抗原进入机体时，机体就会产生免疫应答，清除抗原。有外源抗原进入机体，机体的细胞开始一连串的免疫反应，产生不同的物质，选择相应的细胞使其活化、增值、分化成抗体或产生免疫效应细胞；当同种抗原再次进入机体时就会更快、更强产生更多的抗体。利用兔的免疫应答来产生相应的抗体，然后从兔的血清中提取免疫球蛋白，检测效价，分离、纯化。即得到相应的免疫球蛋白。 　　 本次实验中猪T细胞就是相当于外源抗原，使机体（兔）产生免疫，发生体液免疫，得到实验目的，取得抗猪T细胞兔免疫球蛋白。 实验设计思路 准备实验所需主要物品：猪T细胞；健康家兔 药品及试剂前处理 对实验动物进行分组及处理 3.1 分组及处理: 将兔随机均分成两组，A实验组、B对照组。给每组每只兔子用酒精把兔的耳朵进行消毒，从兔耳缘静脉取20～30ml的血，同时给兔注射灭菌的生理盐水。测定抗猪T细胞兔免疫球蛋白（一般是没有的）。 3.2 A组实验组： 每只兔静脉注射溶于100ml生理盐水中的300—500ug猪T细胞作为外来抗原，并注射一定量的免疫佐剂来增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生，然后正常喂养。 3.3B 组对照组： 每只兔静脉注射100ml生理盐水，然后正常喂养。 4.正常喂养2—3周后，A组加强免疫。试剂的量约为第一次的1/4，不加入免疫佐剂。B组注射等量生理盐水。 5.正常喂养2周后，用酒精把A、B组每只兔的耳朵进行消毒，从兔耳缘静脉取20～30ml的血，同时给兔注射灭菌的生理盐水。分别放入已标号的离心管中。 6.用紫外-可见分光光度法测定抗T细胞兔免疫球蛋白的含量。 6.1 提取血清： 在室温下1h左右，凝固后，置4℃下，过夜（切勿冰冻）析出血清，离心，4000rpm,10min。在无菌条件，吸出血清。 6.2 抗原抗体结合： 将猪T细胞于血清中抗体特异性识别结合，加入辣根过氧化酶。 6.3 用紫外分光光度法测定含量： 测定后可通过标准抗体标准曲线计算。 7.分析、比较实验组与对照组的数据。 8. 将实验中血清的效价的评定及格的分装（0.05～0.2ml），贮于-40℃以下冰箱，或冻干后贮存于4摄氏度冰箱保存。 谢谢观赏 * * 兔免疫球蛋白的制备 *